α-CGRP介導的硝酸甘油對大鼠腸系膜血管床的延遲保護作用.pdf

1、降鈣素基因相關肽(CGRP)作為辣椒素敏感感覺神經(jīng)元的主要遞質,具有廣泛的生物學作用,廣泛分布于中樞及外周血管組織.近年研究發(fā)現(xiàn),CGRP介導了心肌及心外組織的早期及延遲預適應保護.最近研究發(fā)現(xiàn),硝酸甘油(NTG)誘發(fā)的心肌延遲保護與刺激α-CGRP的合成與釋放有關.我室前期研究證明,CGRP也介導大鼠小腸的缺血預適應及硝酸甘油藥理預適應.該實驗試圖證明,硝酸甘油是否誘發(fā)大鼠腸系膜血管床延遲保護,保護作用是否與刺激α-CGRP的合成與釋

2、放有關.該實驗分兩部分.(一)CGRP介導硝酸甘油預適應誘發(fā)的大鼠腸系膜血管床延遲保護.夾閉Wistar大鼠腸系膜上動脈30min,再灌注60min,造成缺血再灌注損傷(I/R).實驗前24h靜脈注射硝酸甘油(120 μ g/kg),觀察其對麻醉狀態(tài)下大鼠腸系膜血管床缺血再灌注損傷的延遲保護作用.結果顯示,NTG組較I/R組血清乳酸脫氫酶(LDH)釋放顯著減少(P<0.01);血漿CGRP含量顯著回升;形態(tài)學小腸粘膜損傷顯著減輕(P<0

3、.05).但使用辣椒素(Capsaicin)耗竭CGRP則消除NTG的保護作用.說明NTG可以誘導大鼠腸系膜血管床產(chǎn)生對I/R的延遲保護作用,其保護作用與促進CGRP釋放有關.初步揭示CGRP介導了NTG誘導的大鼠腸系膜血管床延遲保護.(二)NTG誘發(fā)大鼠腸系膜血管床延遲保護作用中α-CGRP合成增強.取wistar大鼠胸腰段背根神經(jīng)節(jié)(DRG),提取總RNA.以β-肌動蛋白(β-actin)為內參照,用RT-PCR方法檢測CGRP m

4、RNA,進行半定量分析.實驗前8h、24h靜脈注射硝酸甘油(120 μ g/kg)觀察NTG對大鼠腸內臟感覺神經(jīng)CGRP合成的影響.結果顯示,NTG組α-CGRP mRNA表達顯著增加,伴有血漿CGRP放免活性時間依賴性的升高,與對照組相比P<0.01,而β-CGRP mRNA表達無明顯改變(P>0.05).預先給予辣椒素則阻止NTG增加α-CGRP合成的作用.說明NTG可以刺激CGRP的合成,而且是α亞型.初步揭示了NTG誘發(fā)的大鼠腸

5、系膜血管床延遲保護作用與刺激α-CGRP合成與釋放有關.另外,在兩部分實驗中我們還使用了亞甲藍(MB,30mg/kg i.p.),一種可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)抑制劑,以研究NO-cGMP途徑在CGRP介導的硝酸甘油(NTG)預適應誘發(fā)的大鼠腸系膜血管床延遲保護中的作用.結果顯示,NTG預處理使大鼠血清一氧化氮(NO)水平較I/R組顯著升高(P<0.05).使用亞甲藍后,NTG升高NO的作用不受影響,但NTG升高血漿CGRP水平和增加