Salusin-α基因真核表達載體的構建及在HEK293細胞中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究增強型綠色熒光蛋白真核表達載體Salusin-a（pEGFP-Salusin-a）的構建及在人胚胎腎細胞系293細胞（HEK293）中的表達。并探討冠心病患者血漿Salusin-a水平與冠狀動脈粥樣硬化之間的關系。
　　 方法：連續(xù)收集冠狀動脈造影證實的冠心病患者92例為研究對象，按臨床表現分為穩(wěn)定型心絞痛(SA)組和急性冠脈綜合癥(ACS)組；分別測定人血漿Salusin-a水平并進行Genisini評分，分析Sal

2、usin-a與冠狀動脈粥樣硬化之間的關系。提取人單核細胞系THP-1細胞Salusin-a的mRNA，逆轉錄多聚酶鏈反應（RT-PCR）擴增Salusin-a基因，克隆入pEGFP-N3載體，雙酶切、菌落PCR及測序鑒定pEGFP-Salusin-a質粒。用脂質體轉染pEGFP-Salusin-a入HEK293細胞，分為轉染細胞組，質粒對照組和空白對照組檢測，分析各組熒光蛋白和Salusin-a基因的表達。
　　 結果：冠心病患

3、者中血漿Salusin-a的水平明顯比健康對照組低，且Salusin-a與代表冠狀動脈病變程度的Gensini評分呈負相關。成功構建pEGFP-Salusin-a質粒，并轉染HEK293，細胞轉染效率86％，轉染細胞組和質粒對照組綠色熒光蛋白的表達明顯高于空白對照組，（p<0.05）；轉染細胞組和質粒對照組Salusin-a mRNA的表達高于空白對照組，（p<0.05）。
　　 結論：冠心病患者血漿Salusin-a水平顯著降

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