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1、目的:探討E-cadherin在結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞系中的蛋白表達(dá)及其甲基化狀況,分析二者的關(guān)系以及甲基化抑制劑對(duì)其影響,了解DNA甲基化在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法:利用人結(jié)腸癌細(xì)胞系HT-29;用免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5.氮雜脫氧胞苷(5-Aza-CdR)干預(yù)前后的HT-29細(xì)胞系E-cadherin的表達(dá)變化;采用甲基化特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(MSP)檢測(cè)HT-29細(xì)胞中E-cadherin基因啟動(dòng)區(qū)域甲
2、基化狀態(tài)及去甲基化作用后甲基化的變化。 結(jié)論:1) 結(jié)腸癌中E-cadherin的蛋白表達(dá)下調(diào),且E-cadherin低表達(dá)與其啟動(dòng)區(qū)域異常甲基化相關(guān);2) 去甲化作用對(duì)HT-29細(xì)胞株E-cadherin的表達(dá)有明顯的上調(diào)作用,提示尋找特異性抑制甲基化酶活性的藥物是腫瘤治療的一個(gè)方向;3) E-cadherin基因啟動(dòng)區(qū)域異常甲基化可能是與結(jié)腸癌發(fā)生有密切關(guān)系的重要分子事件,為結(jié)腸癌的臨床早期診斷、檢測(cè)和治療提供一定的分子理論
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