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文檔簡介
1、桔全爪螨Panonychus citri McGregor,屬蛛形綱,蜱螨目,葉螨科,全爪螨屬,是一種嚴重危害柑桔的世界性害螨。由于對桔全爪螨的防治長期依賴于化學農藥,用藥頻繁而不合理,加之該螨體小、世代多、繁殖速度快、發(fā)育歷期短等特點,抗性發(fā)展極為迅速,嚴重威脅著生產中化學防治的有效性。此外由于體小、無翅,其遷移能力非常有限,僅能靠爬行進行短距離移動或吐絲借氣流在空中進行較長距離的移動,從而導致不同種群間遺傳分化的存在。 本研
2、究綜合運用了生物測定、同工酶技術和微衛(wèi)星技術,探討桔全爪螨不同種群對噠螨靈和阿維菌素兩種藥劑的敏感性、取食不同種質資源桔全爪螨種群的遺傳分化,探討藥劑敏感性與酯酶同工酶的相關性,尋求桔全爪螨種群抗藥性的生化監(jiān)測指標,從而為桔全爪螨種群的可持續(xù)控制提供理論依據。 生物測定結果表明,取食不同柑桔種質資源的桔全爪螨種群對噠螨靈和阿維菌素的敏感性存在一定的差異。對噠螨靈的相對敏感性由強到弱依次為太田椏柑種群、大浦種群、枳橙種群、尤力克檸
3、檬種群和紐荷爾種群;對阿維菌素的相對敏感性由強到弱依次為大浦種群、枳橙種群、尤力克檸檬種群、太田椪柑種群和紐荷爾種群。其中取食紐荷爾的桔全爪螨種群對噠螨靈和阿維菌素均最不敏感,其LC50分別是太田槿柑種群和大浦種群LC50的2.43和3.86倍。 酯酶同工酶電泳結果表明,桔全爪螨的酯酶可分為兩組,分別是a-Est和β-Est,其中a-Est多態(tài)性強而適于進行種群遺傳結構分析。取食不同柑桔種質資源的桔全爪螨種群的酯酶同工酶電泳酶譜
4、存在差異性,不同種群在a-Est位點的基因型頻率和等位基因頻率有所差異。取食尤力克檸檬的桔全爪螨種群a-Est基因型AB頻率最高,為0.57,而取食大浦的種群最低,為0.27。相反取食大浦的種群a-Est基因型AA頻率最高,為0.73,取食紐荷爾的種群最低,為0.10。另外,本研究中取食大浦的種群未檢測到基因型BB。桔全爪螨a-Est等位基因A的頻率在取食大浦的種群中最高,為0.86,而等位基因B的頻率在取食紐荷爾的種群中最高,為0.6
5、5。統(tǒng)計分析結果表明,取食不同柑桔種質資源的桔全爪螨種群對阿維菌素的敏感性與其等位基因B的頻率之間存在顯著的相關性。由此推知,酯酶在桔全爪螨對阿維菌素的解毒代謝方面起著重要作用,a-Est的等位基因B頻率的增高可能是桔全爪螨對阿維菌素不敏感性增強的原岡之一,這也意味著a-Est的基岡型或基因頻率有可能作為監(jiān)測田間不同種群對阿維菌素敏感性的重要指標之一。利用三條微衛(wèi)星引物分別對桔全爪螨五個種群的基因組進行擴增。結果表明,每條引物均能擴增出
6、數量不同的條帶,同一引物在不同種群中擴增出的條帶也不相同。三條引物產生的條帶從4條(引物S1)到10條(引物33.1 core sequence),擴增條帶多態(tài)性均較高,適合于進行多態(tài)性分析。以33.15核心序列為引物,在所有種群中共擴增出大小在120-1500 bp之間的10個片段;以N1序列為引物,在所有種群中共擴增出大小在100-1500 bp之間的8個片段;以S1序列為引物,在所有種群中共擴增出大小在100-530 bp之間的4
7、個片段。 通過a-酯酶等位基因頻率分析對不同柑桔種質資源上桔全爪螨各種群的聚類結果表明,太田椪柑和尤力克檸檬兩種群首先聚在一起,然后依次與枳橙、紐荷爾種群聚在一起,最后與大浦種群聚在一起。通過三個微衛(wèi)星引物(33.15核心序列、S1和N1)分析對不同柑桔種質資源上桔全爪螨各種群的聚類結果表明,太田椏柑和紐荷爾兩種群首先聚在一起,然后與尤力克檸檬種群、枳橙種群依次聚在一起,最后與大浦種群聚在一起。兩種途徑建立的聚類圖均表明,太田椪
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