β-catenin蛋白敲除抗肺上皮細胞-間質轉化的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過在肺泡Ⅱ型上皮細胞內轉染β-catenin蛋白敲除載體(SCF～(β-TrCP)-Ecad),來觀察β-catenin蛋白敲除對TGF-β1誘導的肺泡Ⅱ型上皮細胞-間質轉化的影響作用,進一步探討β-catenin信號通路在TGF-β1致上皮細胞-間質轉化(EMT)中的作用及β-catenin蛋白敲除對EMT的治療作用。
　　 方法:在體外培養(yǎng)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞(RLE-6TN),分別采用空質粒(pcDNA3)、β-c

2、atenin蛋白敲除載體(SCF～(β-TrCP)-Ecad)轉染RLE-6TN后,TGF-β1(5ng/mL)干預24 h,分為正常對照組(A組)、RLE-6TN加TGF-β1組(B組)、pcDNA3轉染加TGF-β1組(C組)、SCF～(β-TrCP)-Ecad轉染加TGF-β1組(D組),采用Western blot檢測各組細胞E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和纖維連接蛋白(Fn)的表達;采用

3、RT-PCR技術檢測β-catenin途徑下游轉錄產物Snail表達。
　　 結果:
　　 1、Western blot檢測各組細胞E-cadherin、α-SMA、Fn蛋白水平:與A組比較,B組、C組其α-SMA、Fn蛋白表達顯著升高, E-cadherin表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);B組與C組比較無明顯統(tǒng)計學差異,與B組、C組比較,D組其α-SMA、Fn蛋白表達顯著降低,而E-cadherin表達

4、顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A組與D組比較無明顯統(tǒng)計學差異。
　　 2、各組細胞β-catenin途徑下游轉錄產物Snail表達的實時定量PCR()結果:與A組比較,B組、C組其β-catenin途徑下游轉錄產物Snail表達增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);B組與C組比較無明顯統(tǒng)計學差異,與B組、C組比較,D組其β-catenin途徑下游轉錄產物Snail表達降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A組與

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