Cetuximab聯(lián)合NK細胞對結直腸癌裸鼠移植瘤ADCC作用的研究.pdf

1、目的:觀察抗EGFR單克隆抗體Cetuximab聯(lián)合NK細胞對不同EGFR表達水平的人結直腸癌細胞LOVO、SW620裸鼠移植瘤的生長抑制作用;探討Cetuximab在結直腸癌裸鼠體內的抗體依賴細胞介導的細胞毒性(antibody dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的抗腫瘤作用。
　　方法:構建大腸癌LOVO和SW620細胞的裸鼠移植瘤模型,隨機分成6組,每組5只,分別給予:

2、>　?、貾BS;
　?、贑etuximab;
　?、踙IgG;
　?、躈K細胞;
　?、輍IgG+NK細胞;
　　⑥Cetuximab+NK細胞等處理。
　　Cetuximab及hIgG按1mg/kg每周三次腹腔注射給藥,NK細胞每周一次尾靜脈注射2×106個細胞;觀察荷瘤裸鼠活動情況及移植瘤生長變化,每周兩次測量腫瘤長、短徑,計算腫瘤體積,描繪腫瘤生長曲線;療程結束3天后處死裸鼠,剝離腫瘤,稱取瘤重

3、,計算抑瘤率;腫瘤標本行HE染色,觀察病理變化,并應用免疫組化方法檢測EGFR及細胞增殖指標Ki-67的表達情況,同時行TUNEL染色檢測細胞凋亡情況。
　　結果:1.Cetuximab聯(lián)合NK細胞組對LOVO移植瘤有顯著生長抑制作用(P﹤0.05),而其他各組間則無顯著性差別(P﹥0.05);各組對SW620移植瘤均無明顯抑制作用(P﹥0.05);
　　2.EGFR免疫組化顯示:LOVO(+++),SW620(-),從裸鼠

4、體內實驗證實所選細胞系EGFR的表達情況;
　　3.Ki-67免疫組化顯示LOVO移植瘤中Cetuximab聯(lián)合NK細胞組Ki-67的標記指數(shù)LI較其他各組有所下降,較PBS對照組下降最明顯(P﹤0.05),差異有統(tǒng)計學意義,其他各組間及SW620移植瘤各組間無明顯差異(P﹥0.05),表明Cetuximab聯(lián)合NK細胞可以抑制LOVO移植瘤細胞的增殖;
　　4.TUNEL染色顯示,LOVO移植瘤中Cetuximab聯(lián)合NK

5、細胞組的凋亡指數(shù)AI明顯高于其他各組,同時單獨Cetuximab組AI亦高于PBS對照組,差異有統(tǒng)計學意義,表明Cetuximab與NK細胞聯(lián)合作用可以促進LOVO移植瘤細胞凋亡。
　　結論:Cetuximab聯(lián)合NK細胞可對結直腸癌裸鼠移植瘤發(fā)揮ADCC抗腫瘤作用,并且ADCC作用與腸癌細胞表面EGFR表達水平相關,EGFR高表達者ADCC抗腫瘤效應顯著,EGFR不表達者則不敏感。Cetuximab聯(lián)合NK細胞生物治療有望成為治