從噬菌體展示肽庫(kù)中篩選CCR5膜外第一胞外環(huán)(ECL-1)的結(jié)合肽及其抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：本文研究從噬菌體隨機(jī)七肽庫(kù)中篩選CCR5膜外第一胞外環(huán)(ECL-1)的結(jié)合多肽及其該多肽對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。 方法：首先，以ECL-1為靶分子進(jìn)行親和篩選，共進(jìn)行三輪“吸附-洗脫-擴(kuò)增”的篩選過(guò)程，隨機(jī)挑取三輪篩選后的單個(gè)噬菌體克隆進(jìn)行ELISA分析，挑選陽(yáng)性克隆進(jìn)行DNA測(cè)序，合成外源多肽，通過(guò)小鼠耳片的腫脹程度和HE染色來(lái)觀察該多肽對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。 結(jié)果：經(jīng)三輪篩選后隨機(jī)挑取的15個(gè)噬菌體克

2、隆均為陽(yáng)性，與ECL-1具有高親和力，且這些陽(yáng)性噬菌體克隆經(jīng)DNA測(cè)序后含有共同的外源氨插入的基酸序列。合成的多肽和篩選得到的陽(yáng)性噬菌體克隆均可顯著減輕二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳朵水腫、充血和炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。 討論：采用噬菌體隨機(jī)七肽庫(kù)我們獲得了能與ECL-1具有高親和力陽(yáng)性噬菌體克隆和多肽，它們能明顯抑制炎癥早期的滲出、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，其抗炎機(jī)制可能是阻斷了CCR5與其配體的結(jié)合，從而抑制了白細(xì)胞的浸潤(rùn)和游走。本研究為炎癥的靶向治

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