Ezrin蛋白在食管癌中表達模式的改變.pdf

1、Ezrin/Radixin/Moesin是一組高度同源蛋白,統稱為 ERM,是近年來腫瘤相關蛋白研究領域中的熱點。ERM蛋白大多位于絲狀突和膜的伸展部位,其基本功能是將肌動蛋白栓系到細胞膜和錨定到膜蛋白的特定部位上,這樣可維持細胞膜表面的一些特殊結構,如微絨毛和細胞膜突起。除此之外,ERM蛋白還參與細胞表面粘附分子的定位,通過細胞與細胞,細胞與基質之間的相互作用參與細胞粘附作用,ERM蛋白還是酪氨酸激酶的受體,并通過RhoGTP酶參與信

2、號轉導,同時參與Akt介導的細胞凋亡機制。因此,ERM蛋白通過維持細胞的基本形態(tài)和運動而與腫瘤的發(fā)生發(fā)展特別是侵襲轉移密切相關。
　　本課題組以往研究發(fā)現,具轉移特性的SHEEMT食管癌細胞Ezrin表達水平顯著高于其前體不具轉移特性的SHEEIMM永生化食管上皮細胞Ezrin表達水平。然而,到目前為止,關于 ERM蛋白在食管癌組織中的表達情況以及其與患者的臨床及病理資料如病理分級、臨床分期及淋巴結轉移之間的相關性還未見報道,因此

3、本課題在原有工作基礎上,對食管癌臨床樣本中Ezrin的表達模式進行了研究,并且檢測了ERM家族中另外兩個成員的表達情況,以期對該家族成員在食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用有更廣泛和進一步認識。
　　內容與方法:
　　1.收集89例食管組織石蠟樣本,包括40例食管癌組織、42例切緣食管粘膜組織及7例食管卷片蠟塊,用免疫組織化學方法檢測Ezrin的表達及其定位情況。
　　2.用western blot方法檢測新鮮食管癌及其切緣食管粘

4、膜組織中的Ezrin、Radixin、Moesin和PCNA蛋白的表達水平。
　　3.以β-actin為內參照,用熒光定量RT-PCR檢測新鮮食管癌及其切緣食管粘膜組織中Ezrin基因的mRNA水平。
　　結果:
　　1.免疫組織化學結果顯示,Ezrin在切緣食管粘膜細胞中主要分布在胞膜,而在高分化食管癌組織中,胞漿和胞膜均出現Ezrin陽性信號,在中分化食管癌組織中,Ezrin則彌散分布于胞漿中。
　　2. W

5、estern blot結果顯示在49例配對樣本食管癌組織中,有13例樣本Ezrin表達上調,占26.5％;另外36例Ezrin表達下調,占73.5%。
　　3.熒光定量RT-PCR結果顯示癌組織與切緣食管粘膜組織相比,Ezrin基因mRNA的水平有顯著性差異(P<0.05),且切緣組織中Ezrin基因mRNA的相對拷貝數是癌組織中的3.60±3.60倍。
　　4.與切緣食管粘膜組織相比,PCNA在43例(87.8%)癌組織中

6、的表達水平明顯升高。
　　5.統計學分析發(fā)現,在食管癌組織中,Ezrin表達下調組PCNA的表達水平(10.06±9.74, mean±SD)明顯高于Ezrin表達上調組中PCNA的表達水平(5.01±4.47,mean±SD)(P<0.05)。
　　6.通過western blot檢測ERM蛋白在67例食管癌及其切緣食管粘膜組織中的表達,發(fā)現在癌組織中,Ezrin/Radixin,47例表達下調(T/N<1),20例表達上

7、調(T/N>1);而 Moesin,10例表達下調(T/N<1),57例表達上調(T/N>1)。
　　7.通過統計學分析,發(fā)現 Ezrin表達水平與患者年齡、性別、腫瘤淋巴結轉移及臨床分期和病理分級等臨床指標之間沒有明顯相關性。
　　結論:
　　1. Ezrin在食管癌及切緣食管粘膜組織中的位置分布有胞膜分布、胞漿分布和胞膜胞漿混合分布等三種模式。惡性程度越高的癌細胞越易具有胞漿分布模式,說明Ezrin細胞定位的變化可