人胎盤、臍帶及骨髓源性間充質干細胞生物學性狀的比較.pdf

1、目的：比較人胎盤、臍帶及骨髓源性間充質干細胞（MSCs）的生物學性狀。
　　方法：采用組織塊貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)人胎盤、臍帶源性基質細胞（SCs），采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)人骨髓源性SC。采用流式細胞儀檢測CD29、CD34、CD44、CD133、HLA-DR、vWF的表達及細胞周期。應用MTT法檢測并比較三種SCs的增殖情況。應用免疫熒光技術檢測并比較MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三種SCs的表達情況；在體外

2、誘導三種SCs向成骨細胞、脂肪細胞、神經細胞方向分化，并通過特異性染色鑒定并比較其分化能力。
　　結果：采用組織塊貼壁法能成功獲得貼壁生長的成纖維樣人胎盤、臍帶源性SCs，采用密度梯度離心法能成功獲得貼壁生長的骨髓源性SCs；流式細胞術分析結果示，人胎盤、臍帶及骨髓源性SCs高表達CD29、CD44，陰性表達CD34、CD133、HLA-DR及vWF，細胞周期結果示，三種SCs大部分均處于G0/G1期，僅少數處于分裂期，但臍帶源性

3、SCs處于G0/G1期細胞最多，而處于S期細胞最少，處于G2M期細胞介于胎盤及骨髓源性SCs之間；免疫熒光示MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三種SCs中表達情況相似，即均為陽性表達，且熒光定位在細胞的胞漿；MTT檢測結果顯示，胎盤與臍帶源性SCs增殖較快，兩者增殖速率無差異。三種SCs經向脂肪細胞誘導后油紅O染色陽性，但臍帶源性SCs分化為脂肪細胞的數量多，著色深；向成骨細胞誘導后茜素紅染色為陽性，向神經細胞誘導后，N