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文檔簡介
1、目的:觀察正常小鼠足細胞上TLR的表達情況及TLR4在其配體LPS介導的足細胞損傷中所起的作用及其可能的信號通路。
方法:用RT-PCR檢測正常培養(yǎng)的小鼠足細胞表面TLRmRNA的表達情況。根據小鼠足細胞與LPS共同孵育時間把足細胞分為4組:0h組、3h組、6h組和16h組;按刺激所用LPS濃度把足細胞分為3組:0μg/ml組、10μg/ml組和20μg/ml組。用流式細胞術、RT-PCR和WesternBlot分別檢測各組足
2、細胞的凋亡情況及TLR4、MyD88、TRIF和caspase8的mRNA與蛋白水平的表達變化。
結果:正常小鼠足細胞上有TLR1、TLR2、TLR3和TLR4的mRNA表達。LPS刺激后足細胞有較低水平凋亡現(xiàn)象,以6小時凋亡現(xiàn)象最明顯且隨著濃度增加而增加。不同濃度LPS刺激小鼠足細胞后,MyD88、TRIF和caspase8的核酸及蛋白表達隨濃度增加而增多。
結論:LPS可通過TLR4的兩條信號通路激活caspas
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