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文檔簡介
1、目的:通過研究基因轉染的SPATA5L1對KB細胞增殖和遷移能力的影響以及對Wnt/β-catenin信號通路的作用,探索腫瘤放化療后復發(fā)和轉移的分子機制。
方法:構建一攜帶全部SPATA5L1 cDNA序列的重組質粒(pEX-1-SPATA5L1)并轉染到KB細胞,得到穩(wěn)定表達的轉染細胞株。不攜帶基因的空質粒轉染細胞株和非轉染KB細胞作為對照細胞。顯微鏡觀察轉染細胞株的形態(tài)學變化,CCK-8比色法檢測了轉染細胞株的增殖能
2、力,Transwell遷移實驗觀察轉染細胞株的遷移能力,分別用熒光定量PCR和蛋白印跡技術檢測了轉染細胞內與Wnt信號通路有關的基因E2F1、β-catenin和c-myc的mRNA表達水平和蛋白含量變化。
結果:成功獲得穩(wěn)定高表達SPATA5L1的轉染細胞株pEX-1-SPATA5L1-KB細胞。與兩種對照細胞相比較,轉染細胞的形態(tài)明顯梭形、纖維細胞樣改變,細胞增殖和遷移能力明顯增強(p<0.01),β-catenin和
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