腫瘤細胞株Hela膜表面糖鏈對GJIC的影響及機制的初步探討.pdf

1、中國海洋大學碩士學位論文腫瘤細胞株Hela膜表面糖鏈對GJIC的影響及機制的初步探討姓名：王麗娟申請學位級別：碩士專業(yè)：生藥學指導教師：辛現(xiàn)良20080601Cx43是一個不含糖基化位點的蛋白，因此唾液酸和D1，6分支的減少不會對其起到直接的作用。推測其它蛋白上唾液酸和D1，6分支的減少(如細胞間粘附分子)通過影響自身的功能，進而引起一系列的變化，從而影響了Cx43及其相關蛋白表達及分布，并進一步影響了通道的形成、開放。目前研究糖鏈主要

2、通過化學工具藥及分子生物學等手段，在本文中采用了化學工具藥(衣霉素、唾液酸苷酶)以及RNA干擾的技術抑制糖基化，并利用了現(xiàn)代分子生物學技術，細胞生物學技術、多種激光生物學(LSM、FCM)技術，研究了腫瘤細胞株Hela膜表面大量異常糖鏈的表達對OJIC的影響，并對腫瘤細胞膜表面大量異常唾液酸表達抑制OJIC的機制進行了初步的探討。本文利用衣霉素、唾液酸苷酶等化學工具藥去除膜表面相應糖鏈以及RNA干擾技術瞬時沉默Hela細胞中CmTV活性

3、，經劃痕染料示蹤(SLDT)及熒光淬滅恢復(F凡心)實驗檢測，結果均都檢測到Heb細胞GJIC增強：唾液酸苷酶去除HeLa細胞表面砣3及酡6唾液酸后，通過對機制的初步探討研究發(fā)現(xiàn)，Cx43表達水平及磷酸化變化不明顯，但Cx43分布發(fā)生變化，使位于間隙連接斑處的Cx43增多：且另外兩個Cx43相關蛋白ZO1／NCadherin總體的表達量不變，但能降低NCadherin分子的唾液酸含量，導致NCadhorin與Cx43共定位增多，同時使與