重組五步蛇毒纖溶酶（rFⅡ）非臨床血液藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的：用放射性核素示蹤法研究重組五步蛇毒纖溶酶(rF Ⅱ)在新西蘭兔和Beagle犬體內(nèi)、外的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，獲得藥物的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，闡明藥物在體內(nèi)的吸收過程和特點(diǎn)。 方法：用Iodogen固相氧化法制備<'125>Ⅰ-rF Ⅱ，Sephadex G-25柱層析過濾法純化標(biāo)記化合物，用紙層析法測定標(biāo)記率和放射化學(xué)純度。分別用新西蘭大白兔和Beagle犬進(jìn)行體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)：按照新西蘭大白兔和Beagle犬的急性毒性實(shí)

2、驗(yàn)和長期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算它們的高、中、低劑量，兔三個(gè)劑量分別為：0.2mg·kg<'-1>、0.6mg·kg<'-1>、1.8mg·kg<'-1>；犬三個(gè)劑量分別為：0.08mg·kg<'-1>、0.4mg·kg<'-1>、2.0mg·kg<'-1>。兔從耳緣靜脈給藥，犬從前肢靜脈給藥。于注射后的 1min、3min、5min、 10min、20min、30min、 1h、2h、4h、6h、9h、12h共13個(gè)時(shí)間點(diǎn)靜脈采血，測量各個(gè)時(shí)

3、間點(diǎn)樣品的放射性濃度(dpm·ml<'-1>)，紙層析法分析其中含有<'125>Ⅰ-rF Ⅱ原形物的百分比(﹪)，計(jì)算血漿樣品中<'125>Ⅰ-rF Ⅱ原形物的放射性濃度(dpm·ml<'-1>)，通過該藥的放射性比活度(dpm·ng<'-1>)或者從<'125>Ⅰ-rF Ⅱ放射性濃度(dpm·ml<'-1>)-rF Ⅱ原形物血藥濃度(ng·ml<'-1>)工作曲線上計(jì)算出血漿樣品中rF Ⅱ原形物的濃度(ng·ml<-1>)：血漿樣品中

4、rF Ⅱ濃度(ng·ml<'-1>)=<'125>Ⅰ-rF Ⅱ的放射性濃度(dpm·ml<'-1>)÷<'125>Ⅰ-rF Ⅱ的放射性比活度(dpm·ng<'-1>)。 結(jié)果與結(jié)論：用Iodogen固相氧化法制備<'125>Ⅰ-rF Ⅱ標(biāo)記率為55﹪～65﹪；經(jīng)Sephadex G-25柱純化后，放射化學(xué)純度可達(dá)95﹪以上；用紙層析法分析rF Ⅱ的準(zhǔn)確度為96.4﹪～102.8﹪，用批內(nèi)變異系數(shù)(CV﹪)表示的精密度為0.98﹪

5、～2.53﹪。與硫酸銨〖(NH<,4>)<,2>SO<,4>〗蛋白沉淀法和凝膠過濾法比較，紙層析法更加簡便和靈敏。藥代結(jié)果：低、中、高三個(gè)劑量組靜脈給藥后兔的主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)C<,0>分別為2.05±0.51ug·ml<'-1>、5.63±0.96ug·ml<'-1>、19.21±4.78ug·ml<'-1>，其比值為1.0：2.7：9.4； AUC<,0～∞>分別為0.84±0.26ug·ml<'-1>·h、3.82±1.13ug·ml

6、<'-1>·h、9.07±2.19ug·ml<'-1>·h，比值為1.0：4.5：10.8；t<,1/2β(h)>分別為2.59±0.61h、1.98±0.24h、2.71±0.39h，比值為1.0：0.8：1.0。因此可以認(rèn)為本品在實(shí)驗(yàn)的劑量范圍內(nèi)(0.2mg·kg<'-1>～1.8mg·kg<'-1>)，在新西蘭大白兔體內(nèi)動(dòng)力學(xué)特征呈一級線性動(dòng)力學(xué)過程；犬靜脈給藥后，低、中、高三個(gè)劑量組的C0分別為 1.17±0.36ug·ml<'

7、-1>、6.65±0.72ug·ml<'-1>、61.0±11.8ug·ml<'-1>，其比值為1.0：5.7：52.1； AUC<,0～∞分別為0.38±0.1 2ug·ml<'-1>·h、3.41±1.06ug·ml<'-1>·h、32.5±10.5ug·ml<'-1>·h，比值為 1.0：9.0：85.5；t<,1/2β(h)>分別為0.74±0.27h、1.30±0.66h、1.32±0.30h，比值為1.0：1.8：1.8。因