NF-κB對成年大鼠神經干細胞增殖和分化的影響及自噬在其中的作用.pdf

1、目的：本文在QA損傷大鼠紋狀體所導致的病理模型上，就NF-κB在大鼠腦內NSCs的增殖和分化中所起到的作用進行研究，并初步研究自噬在該過程中的作用。 方法：采用紋狀體注射QA(60 nmol)的方法建立腦損傷的病理模型，腦損傷后第六天在大鼠的損傷同側側腦室中注射NF-κB抑制劑SN50(10 nmol/ul)或者生理鹽水，并且每隔8小時在大鼠腹腔注射一次BrdU(50 mg/kg)，第七天進行灌流固定。用4％多聚甲醛后固定6-9

2、小時后依次用20％和30％的蔗糖脫水過夜直至腦組織下沉至容器底部，然后在恒冷切片機上切片(20μm)，貼在明膠處理過的載玻片上。我們分別用尼氏染色和免疫組織化學染色法檢測模型的成敗及NSCs的增殖情況：用免疫熒光雙標的方法檢測NF-κB(p65)及其抑制劑SN50對NSCs的增殖與分化的影響；通過檢測自噬蛋白(LC3)的表達情況來觀察自噬在其中的作用。并從同樣的動物模型中提取其紋狀體組織，用Western blot法檢測自噬相關蛋白的表