丙型病毒性肝炎母嬰傳播機制研究——HCV持續(xù)感染對體外培養(yǎng)人合體滋養(yǎng)層細胞生物學性狀的影響及其機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗研究了丙型肝炎病毒(HCV)持續(xù)感染對體外培養(yǎng)人合體滋養(yǎng)層細胞生物學性狀的影響及其機理。主要內容如下： 一、HCV持續(xù)感染對體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細胞生物學性狀的影響。人晚期囊胚著床后，滋養(yǎng)層內層分裂生長的細胞滋養(yǎng)層細胞迅速分化為合體滋養(yǎng)層細胞。合體滋養(yǎng)層細胞對受精卵的著床以及母體/胎兒交互式血液循環(huán)的建立均有重要意義，其可侵入母體子宮蛻膜及子宮螺旋動脈，是胎盤形成的主要功能細胞。合體滋養(yǎng)層細胞是人體正常細胞中唯一具有侵

2、襲能力的細胞，類似于腫瘤細胞。合體滋養(yǎng)層細胞也具有活躍的合成物質的能力，其合成分泌的人絨毛膜促性腺激素(HCG)、人胎盤生乳素(HPL)等對妊娠的維持以及胎兒的發(fā)育均有十分重要的意義。因此，本實驗分別采用Matrigel人工重建基底膜侵襲實驗來研究HCV感染對體外培養(yǎng)人胎盤滋養(yǎng)層細胞侵襲能力的影響，并研究細胞感染HCV后粘附、移動能力以及激素合成分泌能力(以HCG為檢測因子)的改變。研究證實HCV持續(xù)感染可抑制體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細

3、胞包括侵襲能力和激素合成分泌能力在內的多種生物學功能。 二、HCV持續(xù)感染對體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影響。合體滋養(yǎng)層細胞的侵襲能力是其侵入母體子宮蛻膜及子宮螺旋動脈，參與形成胎盤(胎盤屏障)的生物學基礎。研究表明，合體滋養(yǎng)層細胞的侵襲能力與金屬蛋白酶-2(Matrixmetalloproteinase-2，MMP-2)和金屬蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9，MMP

4、-9)密切相關，合體滋養(yǎng)層細胞合成分泌MMP-2和MMP-9，降解細胞外基質(ECM)，穿越ECM間隙，從而完成侵襲過程。在前一部分實驗的基礎上，本部分實驗通過ELISA、明膠酶譜分析以及RT-PCR等方法研究HCV持續(xù)感染對合體滋養(yǎng)層細胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影響，探討HCV感染抑制合體滋養(yǎng)層細咆侵襲能力的具體分子機制。研究結果表明HCV持續(xù)感染時體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細胞MMP-2和MMP-9合成(與侵襲、粘附、運動能力

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