減毒羊痘病毒基因復制非必需片段的篩選與鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、羊痘(山羊痘和綿羊痘)是由羊痘病毒(CapripoxvirUS，CPV)感染山羊和綿羊等偶蹄動物引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類傳染病，我國將其列為一類傳染病。 當前痘病毒活載體疫苗的研究是一個熱點。痘病毒因其具有特異性，含有大量的復制非必需片段可以插入大片段的外源基因等特點而引起了研究者的高度重視。羊痘病毒基因組全長150Kb，基因組結構相當龐大，含有多個復制非必需區(qū)，可以供多種免疫源基

2、因的插入，進而構建成雙價、多價疫苗。而構建羊痘病毒活載體疫苗，其首要的工作就是要進行復制非必需片段的篩選。 本研究通過隨機克隆的方法，將提純后的羊痘病毒基因組 HindⅢ酶切，隨機克隆到pUC18質粒中。通過限制性內切酶片段電泳分析和序列測定分析結果表明，克隆得到6個不同大小的HindⅢ片段PUA、PUB、PUC、PUD、PUE、PUF。將它們和Genebank中登錄的羊痘野毒株Pellor(AY077835)株進行同源性比較，

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