應(yīng)用BERKO和SCID小鼠模型對(duì)ERβ與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性研究.pdf

1、目的：研究雌激素受體不同亞型在子宮內(nèi)膜異位癥及子宮腺肌癥病灶中的分布規(guī)律及與內(nèi)異癥相關(guān)的部分因子(OTR、COX-2等)之間的關(guān)系，在雌激素β受體基因敲除小鼠及SCID小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型，探討雌激素β受體在子宮內(nèi)膜異位癥及子宮腺肌癥發(fā)病過(guò)程中的作用，為臨床應(yīng)用雌激素β受體激動(dòng)劑WAY-200070治療子宮內(nèi)膜異位癥提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)． 方法：1)收集正常子宮內(nèi)膜、正常子宮肌肉、子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜、卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫及子宮

2、腺肌癥組織標(biāo)本，利用Western blotting、RT-PCR、ELISA及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)上述組織內(nèi)ERα、ERβ、COX-2、OTR等蛋白含量及分布；2)利用雌激素β基因敲除小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型，研究ERβ在先天缺乏時(shí)對(duì)內(nèi)異癥病灶形成的影響；3)分別用人正常子宮內(nèi)膜、內(nèi)異癥在位內(nèi)膜、子宮腺肌癥病灶及卵巢異位囊腫壁在SCID小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型，同時(shí)注射雌激素β受體激動(dòng)劑WAY-20007014天，然后處死小鼠取出

3、病灶觀察ERβ對(duì)異位病灶形成的影響。 結(jié)果：1)在不同組織中均有ER的表達(dá)，但ERα含量高于ERβ；OTR及COX-2在內(nèi)異癥在位子宮內(nèi)膜中的蛋白含量明顯高于正常內(nèi)膜，與在位內(nèi)膜中ERα含量呈正相關(guān)，與ERβ無(wú)明顯相關(guān)性。2)應(yīng)用Westernblotting和RT-PCR方法檢測(cè)子宮腺肌癥病灶內(nèi)各種受體蛋白含量與其他部位比較，ERα和ERβ蛋白含量明顯低于其他各組，OTR和COX-2明顯高于其他各組；但免疫組化法顯示ERα、E

4、Rβ在異位病灶及在位子宮內(nèi)膜中的表達(dá)均高于正常子宮內(nèi)膜．3)卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫壁內(nèi)各種受體蛋白含量與其他部位比較，OTR和COX-2蛋白含量顯著高于正常內(nèi)膜和在位內(nèi)膜；ERα顯著低于正常子宮內(nèi)膜和在位內(nèi)膜；而ERβ則無(wú)明顯差異。4)雌激素β受體基因敲除小鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型與同源非敲除小鼠比較無(wú)顯著差異(P＞0.05)，但卵巢切除否對(duì)異位病灶的形成有明顯影響(P＜0.05)．5)利用不同組織在SCID小鼠建立異位癥模型后應(yīng)用雌激素β受

5、體激動(dòng)劑WAY-200070，發(fā)現(xiàn)正常子宮內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及卵巢異位囊腫壁模型組病灶重量在種植后有明顯縮小(P＜0.05)，但與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P＞0.05)；而子宮腺肌癥病灶用藥組重量縮小的差值與對(duì)照組比較有差異(P=0.03)． 結(jié)論：在正常子宮內(nèi)膜、子宮肌肉、內(nèi)異癥子宮在位內(nèi)膜、卵巢異位囊腫及子宮腺肌癥病灶內(nèi)均有ER的表達(dá)，但ERβ含量明顯低于ERα．應(yīng)用ERβ基因敲除小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型顯示ERβ存在與否對(duì)異位