索拉菲尼、PDTC聯用對胰腺癌細胞株PANC-1的作用研究.pdf

1、目的:探討多分子靶向藥物索拉菲尼(sorafenib)聯用PDTC對體外人胰腺癌細胞株PANC-1的細胞增殖、細胞周期的影響;以及其對細胞質和細胞核中NF-kB表達的影響,并探討其可能的作用機制。
　　方法:取對數生長期人胰腺癌細胞株PANC-1細胞用于實驗。試驗組分索拉菲尼單藥物、PDTC單藥組及聯合藥物組,其中設空白對照組,空白對照組為未加藥的培養(yǎng)液。以MTT法檢測各藥物組對胰腺癌細胞株PANC-1細胞增殖的抑制作用;流式細胞

2、儀檢測各組藥物對細胞周期的影響;免疫細胞化學方法觀察各藥物組NF-κB在細胞質和細胞核中表達水平的變化。
　　結果:
　　1.MTT法檢測結果顯示:索拉菲尼和PDTC均能抑制胰腺癌細胞株PANC-1的增殖,且均隨藥物濃度的增加作用也增強,呈劑量—時間雙效應關系(P<0.05);并分別計算出作用48h單藥組細胞的半數抑制濃度(IC50)值索拉菲尼為14.102μmol/L、PDTC為105.717μmol/L,濃度值均較高,說

3、明索拉菲尼和PDTC單藥組對PANC-1缺乏有效抑制;而低濃度索拉菲尼(3μmol/L)和低濃度PDTC(25μmol/L)聯合應用較單用索拉菲尼(3μmol/L)和PDTC(25μmol/L),能顯著提高細胞生長抑制率(P<0.05)。
　　2.流式細胞儀法檢測結果顯示:與空白對照組相比,索拉菲尼(3μmol/L)、PDTC(25μmol/L)、索拉菲尼(3μmol/L)+PDTC(25μmol/L)處理48h后PANC-1細胞

4、的G0/G1期百分比升高,分別為(50.93±3.51,48.07±1.70,74.07±2.40)％,而空白對照組G0/G1期細胞比例(37.97±1.21)%;S期細胞數相應的減少,分別為(37.30±1.70,38.17±0.51)%,而空白對照組S期細胞比例為(45.33±2.03)%,差別同樣有統(tǒng)計學意義(P<0.05);說明索拉菲尼、PDTC及索拉菲尼+PDTC聯合藥物組細胞發(fā)生G0/G1期停滯(P<0.05),且索拉菲尼+

5、PDTC聯合藥物組統(tǒng)計學最為顯著意義。
　　3.免疫組化法檢測結果顯示:NF-κB在對照組中胰腺癌PANC-1細胞胞漿和胞核中均有表達,索拉菲尼誘導48h后NF-κB在胰腺癌PANC-1細胞核內表達明顯增強。然而,當用PDTC聯合索拉菲尼誘導48h后,胰腺癌PANC-1細胞核中NF-κB的表達明顯減弱。
　　結論:索拉菲尼和PDTC在體外對PANC-1細胞增殖均具有抑制作用,但IC50值均較高。PDTC和索拉菲尼聯合應用較單