兩株海洋來(lái)源放線菌的生物堿研究.pdf

1、海洋是高度復(fù)雜的環(huán)境,并擁有多樣化組合的環(huán)境與壓力,鹽度和溫度的極端變化的微生物。海洋放線菌作為藥物先導(dǎo)化合物的重要來(lái)源已引起高度重視,因?yàn)樗麄冇歇?dú)特的生理和代謝功能,不僅能生存在極端的棲息地,而且還提供了產(chǎn)生具有抗腫瘤和其他重要藥理活性的化合物,多柔比星,柔紅霉素和阿霉素等都是放線菌產(chǎn)生的抗腫瘤類(lèi)化合物。
　　采用HPLC和活性相結(jié)合的方法,以MCF-7腫瘤細(xì)胞為篩選模型,對(duì)菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物測(cè)定細(xì)胞毒活性,獲得了較好細(xì)胞毒活性

2、的菌株2株,其中放線菌Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554產(chǎn)生一株微生物主產(chǎn)單一化合物,其次生代謝產(chǎn)物主要為放線菌素D。我們對(duì)海洋來(lái)源放線菌Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554產(chǎn)放線菌素D的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,提高放線菌素D的產(chǎn)量。對(duì)培養(yǎng)基的組成、種齡、裝液量、pH、鹽度和發(fā)酵時(shí)間等條件的研究,通過(guò)單因素和正交試驗(yàn),選擇最優(yōu)發(fā)酵條件;并通過(guò)波譜分析及其理化性質(zhì)確定放線菌素D結(jié)構(gòu)。

3、最后確定最佳培養(yǎng)基為:K2HPO41.5 g、MgSO40.5 g、酵母浸膏5 g、可溶性淀粉22.5 g、陳海水1000 mL;最佳發(fā)酵條件:裝液量150/500 mL(體積分?jǐn)?shù))、種齡4 d、鹽度3％、起始pH=7.5、搖床(180 rpm)發(fā)酵12 d。結(jié)論是以最佳發(fā)酵條件發(fā)酵,優(yōu)化后放線菌素D的產(chǎn)量為優(yōu)化前的3.6倍,達(dá)到364 mg/L。
　　對(duì)來(lái)源于中國(guó)海南三亞紅樹(shù)林保護(hù)區(qū)的土壤樣品中的鏈霉菌 Streptomyces

4、 sanyensis FMA進(jìn)行其次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究。我們通過(guò)添加前體來(lái)獲得結(jié)構(gòu)新穎的化合物,我們向培養(yǎng)基中加入前體5-OH-L色氨酸,乙酸乙酯萃取其代謝產(chǎn)物。采用硅膠柱層析、LH-20凝膠柱層析和半制備高效液相色譜等分離手段,利用理化性質(zhì)和波譜學(xué)方法(IR, UV, MS, NMR等)結(jié)合化學(xué)反應(yīng)的方法闡述了12個(gè)化合物(生物堿類(lèi))的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱參見(jiàn)Table1),其中有三個(gè)新的吲哚咔唑類(lèi)化合物(1-3)。其結(jié)構(gòu)類(lèi)型包括

5、吲哚咔唑類(lèi)生物堿(1-9)、簡(jiǎn)單吲哚衍生物(10-12);其中,吲哚咔唑類(lèi)生物堿仍是是此菌株代謝產(chǎn)物的主要結(jié)構(gòu)類(lèi)型。通過(guò)氣-質(zhì)連用確定了一個(gè)新化合物的絕對(duì)構(gòu)型。
　　綜上所述,本文對(duì)兩株海洋來(lái)源的兩株放線菌的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了系統(tǒng)研究,共分離鑒定了13個(gè)化合物。Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554菌株主產(chǎn)單一化合物,對(duì)Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554菌株以最佳發(fā)酵條件

6、發(fā)酵,優(yōu)化后放線菌素D的產(chǎn)量為優(yōu)化前的3.6倍,進(jìn)一步可為放線菌素D的工業(yè)生產(chǎn)提供了新的生產(chǎn)菌株。從Streptomyces sanyensis FMA菌株分離出12個(gè)生物堿化合物、3個(gè)為新化合物,結(jié)構(gòu)類(lèi)型為吲哚咔唑類(lèi)化合物。說(shuō)明通過(guò)添加前體可以誘導(dǎo)Streptomyces sanyensis FMA菌株產(chǎn)生新的結(jié)構(gòu)類(lèi)型的化合物?？傊?海洋是最有前途的抗腫瘤藥物的來(lái)源地,本研究為抗腫瘤藥物的篩選提供了新的結(jié)構(gòu)類(lèi)型和候選化合物,為海洋藥物