成人骨髓間質干細胞定向誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植治療腦梗塞模型鼠的研究.pdf

1、中山大學博士學位論文成人骨髓間質干細胞定向誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植治療腦梗塞模型鼠的研究姓名：姚曉黎申請學位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：張成20040428成人骨髓間質干細胞定向誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植治療腦梗塞模型鼠的研究中文■要關應用MSC移植治療腦梗塞的報道極少，國內未見報道。研究表明，MSC可分化為神經(jīng)細胞，這為腦梗塞治療研究帶來新的希望。但是，目前MSC體外定向誘導分化為神經(jīng)元樣細胞的條件及機制不明，它在病變組織

2、中維持穩(wěn)定和參與修復的作用機理不清。有關MSC的標記、移植途徑以及移植后處理等問題亟需作進一步研究。本研究將在體外建立成人MSC的培養(yǎng)體系，包括MSC的分離、純化、鑒定與擴增。采用中藥參芪液等不同的方法體外誘導成人MSC分化為神經(jīng)元樣細胞，延長神經(jīng)元樣細胞的存活時間；觀察誘導分化過程中的細胞分裂和凋亡現(xiàn)象，分析相關基因表達的變化，初步探討神經(jīng)分化的機制：運用膜片鉗技術進行神經(jīng)元樣細胞的動作電位檢查；建立腦梗塞模型鼠，進行成人MSC的局部

3、腦內移植治療；在移植后的不同階段檢測成人MSC在大鼠腦內的遷移和分布；運用間接免疫熒光法檢測神經(jīng)元的特異性標志物，并對大鼠的運動功能和行為學進行觀察比較，以評價細胞移植后對受損腦組織的修復作用，探討異基因移植治療途徑，為臨床應用提供理論基礎與實驗依據(jù)。一、材料與方法(一)實驗材料1、骨髓闖質干細胞成人骨髓間質干細胞(hMSC)取白骨髓(非腫瘤或血液系統(tǒng)疾病)。2、實驗動物采用SD大鼠，移植hMSC實驗組18只，移植基礎培養(yǎng)液對照組18只