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文檔簡介
1、將親和作用應用到毛細管電泳(Capillary Electrophoresis，CE)中，形成了CE的一個新分支，這就是“親和毛細管電泳”(Affinity Capillary Electrophoresis，ACE)技術。自20世紀90年代初出現(xiàn)以來，該技術以其強大的分析能力被廣泛地應用于蛋白質、多肽、核酸片段等生物樣品的分離分析，尤其是表征物質間相互作用的各種參數(shù)(如結合常數(shù))的研究中。通過這種方法測得的結合常數(shù)能夠解釋分子之間相互
2、作用的方式和強度，為基于分子識別的應用提供有價值的信息，這些信息在新藥的發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化中有很重要的應用價值。 鑒于ACE法在藥物-蛋白相互作用研究和新藥篩選領域表現(xiàn)出的突出優(yōu)勢和良好前景，本論文對其進行了較深入的研究。首先以牛血清白蛋白(Bovine SerumAlbumin，BSA)和加替沙星(Gatifloxacin，GT)為模型，考察了ACE淌度移動法在研究藥物-蛋白相互作用中的應用，測定了兩者的結合常數(shù)，該研究在國內(nèi)外相關文
3、獻中未見報道。本論文通過優(yōu)化實驗條件，考察了用BSA和GT兩種不同物質分別作為添加劑進行實驗的方法，兩種方法測得的Kb值吻合良好，該值與文獻報道的用其它方法測得的結果也具有很好的一致性，證明了ACE在藥物-蛋白相互作用領域應用的可靠性。同時，為了考察方法間差異對測定值的影響，還用傳統(tǒng)的熒光淬滅法測定了兩者的結合常數(shù)，初步討論了兩種方法各自的優(yōu)缺點。隨后，選用兩種藥物：安非他酮和格列吡嗪作為模擬混合待篩選樣品，在不同濃度BSA做添加劑的條
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