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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討游離脂肪酸(free fatty acid,F(xiàn)FA)對(duì)大鼠甲狀腺細(xì)胞(Fischer rat thyroid cell line-5,F(xiàn)RTL-5)增殖的影響。
方法:
1、分別用不同濃度FFA、同一時(shí)間和同一濃度FFA、不同時(shí)間干預(yù)大鼠FRTL-5細(xì)胞,MTT比色法檢測(cè)大鼠FRTL-5細(xì)胞增殖的情況。
2、用不同濃度FFA干預(yù)大鼠FRTL-5細(xì)胞48h,Western blottin
2、g檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)表達(dá)的變化。
3、用不同濃度FFA、不同作用時(shí)間干預(yù)大鼠FRTL-5細(xì)胞,ELISA測(cè)三碘甲狀腺原氨酸(Triiodothyronin,T3)、甲狀腺素(Thyroxine,T4)水平。
結(jié)果:
1、MTT結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細(xì)胞經(jīng)不
3、同濃度的FFA干預(yù)48h,與正常對(duì)照組相比,0.5、1.0mmol/LFFA組的細(xì)胞存活率略有降低(p>0.05),1.5、2.0、2.5、3.0mmol/LFFA組的細(xì)胞存活率呈濃度依賴性降低(p<0.05),2.5mmol/LFFA組對(duì)大鼠FRTL-5細(xì)胞增殖的抑制程度較1.5、2.0mmol/LFFA組明顯(p<0.05),而與3.0mmol/L FFA組相比,抑制效應(yīng)無(wú)明顯差別(p=0.71)。同時(shí),大鼠FRTL-5細(xì)胞經(jīng)2.5
4、mmol/L FFA分別干預(yù)6、12、24、48h,與正常對(duì)照組相比,6、12h組的細(xì)胞存活率略有降低(p>0.05),24、48h組的細(xì)胞存活率顯著降低(p<0.05),48h組對(duì)大鼠FRTL-5細(xì)胞增殖的抑制程度較24h組明顯(p<0.05)。
2、Western blotting結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細(xì)胞經(jīng)不同濃度的FFA干預(yù)48h,與正常對(duì)照組相比,0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA組GSK
5、-3β的表達(dá)呈濃度依賴性升高(p<0.05),而0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA組β-catenin的表達(dá)呈濃度依賴性降低(p<0.05)。
3、ELISA結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細(xì)胞經(jīng)不同濃度FFA、不同時(shí)間干預(yù),不同濃度FFA對(duì)T3、T4水平有影響(P<0.05),不同時(shí)間對(duì)T3、T4水平也有影響(P<0.05),濃度、時(shí)間兩者之間有交互作用(P<0.05),當(dāng)2.5mmol/LFFA干預(yù)大鼠F
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