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文檔簡介
1、目的:
通過對膝關節(jié)骨關節(jié)炎(KneeOA)患者關節(jié)軟骨TNF-α基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)及TNF-α蛋白表達的檢測,探討TNF-α基因啟動子區(qū)甲基化異常在膝關節(jié)OA發(fā)生、發(fā)展中的作用。
方法:采用酚-氯仿抽提(Sodium-Bisulfite)方法處理基因組DNA,甲基化特異性PCR(methylation-specificPCR,MSP)方法檢測TNF-α基因啟動子區(qū)甲基化變化情況。采用免疫組化方法檢測TN
2、F-α蛋白表達。實驗分為兩組:13例健康人對照組和37例OA患者組。
采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析,作x2或Fisher's確切概率法檢驗和Spearman等級相關分析。
結果:
1.健康人對照組與膝關節(jié)OA患者軟骨TNF-α啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)比較
健康人對照組與膝關節(jié)OA患者組軟骨TNF-α啟動子區(qū)低甲基化百分率分別為15.38%(2/13)和75.67%(28/37),
3、經x2檢驗分析,兩組間的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.健康人對照組與膝關節(jié)OA患者軟骨細胞TNF-α蛋白表達比較
健康人對照組與膝關節(jié)OA患者組軟骨細胞TNF-α蛋白陽性率分別為23.08%(3/13)和78.37%(29/37),經x2檢驗分析,兩組間的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3.TNF-α基因甲基化及蛋白的表達與性別,年齡的關系
TNF-α基因低甲基化及蛋
4、白的表達與性別,年齡無明顯相關性(P>0.05)
4.膝關節(jié)OA患者軟骨TNF-α基因啟動子區(qū)甲基化與蛋白表達相關性分析
28例TNF-α啟動子區(qū)低甲基化的OA患者中,有25例蛋白表達呈現陽性;而29例TNF-α蛋白表達呈現陽性的OA患者中,有25例TNF-α啟動子區(qū)呈現低甲基化,經Spearman等級相關分析,TNF-α啟動子區(qū)低甲基化與蛋白的表達呈顯著正相關。(r=0.467,P<0.01)
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