CD3+CD4-CD8-T(DNT)細(xì)胞對(duì)PC-3荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用及其體外擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、細(xì)胞免疫治療已經(jīng)成為繼手術(shù)、放療、化療后第四種惡性腫瘤的治療方法。CD3＋ CD4－CD8－T（double negative Tcells,DNT）細(xì)胞是一種新型的過(guò)繼免疫治療細(xì)胞。
　　目的：是探討DNT細(xì)胞對(duì)PC-3荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用及其體外擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)研究。
　　方法：
　　1、建立前列腺癌荷瘤小鼠模型：將SCID小鼠隨機(jī)分成3組，皮下注射不同劑量PC-3細(xì)胞以建立荷瘤SCID小鼠人非激素依賴性前列腺癌皮下腫

2、瘤模型。
　　2、利用Rosettesep抗體吸附法和Easysep免疫磁珠法從正常人外周血分離、擴(kuò)增、純化DNT細(xì)胞，利用流式細(xì)胞儀鑒定其純度。
　　3、DNT細(xì)胞在PC-3荷瘤小鼠體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用：當(dāng)皮下荷前列腺癌小鼠腫瘤生長(zhǎng)至0.3cm×0.3cm大小時(shí)，隨機(jī)分為3組，第1組給予DNT細(xì)胞尾靜脈注射，第2組予PBS尾靜脈注射，第3組給予CD8+T細(xì)胞尾靜脈注射。監(jiān)測(cè)SCID小鼠的體重、一般狀態(tài)，每4天測(cè)量PC-3

3、荷瘤小鼠腫瘤的體積。治療28天，處死小鼠，剝除瘤組織，測(cè)量腫瘤重量并計(jì)算抑瘤率。
　　結(jié)果：皮下注射0.5×106個(gè)PC-3細(xì)胞即可成功建立人非激素依賴性前列腺癌系PC-3細(xì)胞荷瘤SCID小鼠模型；通過(guò)Rosettesep抗體吸附法和Easysep免疫磁珠法分離、擴(kuò)增、純化人外周血DNT細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，DNT細(xì)胞純度在98％以上；體外擴(kuò)增的DNT細(xì)胞對(duì)荷人非激素依賴性前列腺癌SCID小鼠皮下移植瘤具有抑制腫瘤生長(zhǎng)作用，腫