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1、氟苯尼考?xì)埩粲趧游镌葱允称分?,會對人的身體健康造成危害,國家明確規(guī)定了氟苯尼考的殘留限量。目前氟苯尼考?xì)埩舻臋z測技術(shù),大多使用LC-MS、HPLC等方法分析檢測,這些方法有一定的優(yōu)點(diǎn),比如假陽性率低,檢測準(zhǔn)確,但同樣具有不可忽視的缺點(diǎn),如樣品前處理程序復(fù)雜,儀器昂貴,用時長,無法大批量檢測,需要專業(yè)人員來操作,面對獸藥使用量越來越大,獸藥殘留現(xiàn)象越來越嚴(yán)重的現(xiàn)狀,這些缺點(diǎn)直接制約了FFC殘留的現(xiàn)場快速檢測,使得食品安全行政執(zhí)法人員無法對
2、FFC進(jìn)行有效的監(jiān)督以及監(jiān)測。本研究旨在建立了動物源性FFC殘留快速檢測的酶免疫方法,以達(dá)到通過酶免疫法快速準(zhǔn)確定量測定 FFC殘留。
本研究首先通過混合酸酐法制備了FFC的完全抗原,通過紫外分光光度法以及紅外光譜的鑒定,證明完全抗原合成成功。選用新西蘭大白兔作為免疫動物,經(jīng)過5次免疫,獲得高效價血清,通過proteinA-sepharuse親和層析法純化血清,經(jīng)過SDS-PAGE驗證,抗體制備成功。其次建立了IC-ELISA
3、法,經(jīng)過對多個實驗條件的優(yōu)化,建立完整的IC-ELISA檢測法。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=-0.19943+1.2313,由此推出其 IC50值為4.5μg/mL,檢測限為0.53ng/mL。再次建立了BA-ELISA法,通過對實驗條件的優(yōu)化,建立了完整的 BA-ELISA法,線性方程為y=-0.32216+1.5559,IC50值為1.9μg/mg。檢測限為0.15ng/mg,兩種方法均對FFC的結(jié)構(gòu)類似物氯霉素有交叉反應(yīng),對其他的
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