基因槍轉多基因楊樹的獲得.pdf

1、楊樹是世界上重要的經濟樹種，又是林木基因工程研究的模式樹種。雖然已有許多楊樹遺傳轉化成功的報道，但獲得的理想植株并不多。究其原因，首先是自然界生物的多數(shù)性狀往往是由多基因控制的，多數(shù)的遺傳轉化研究是將一個或兩個外源基因轉入受體楊樹。為了達到培育高產、優(yōu)質、多抗等性狀的品種目的，需要把三個或更多有用基因導入楊樹中，進行多基因操縱。 本研究通過基因槍共轉化方法將枯草桿菌果聚糖蔗糖酶基因(SacB)、透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)、雙

2、價抗蛀干害蟲基因(BtCry3A+OC-I)、調節(jié)基因JERFs等外源基因導入庫安托楊(P.×euramericacana'Guariento')和銀腺雜種楊(P.alba×P.glandulosa)中，結果如下： 1.卡那霉素篩選。共獲得27株庫安托楊抗性植株和41株銀腺雜種楊抗性植株。 2.點雜交。結果表明，27株抗性株庫安托楊中共有18株檢測到陽性信號，檢出率占66.7％。41株抗性株銀腺雜種楊中共有29株檢測到陽

3、性信號，檢出率占70.7％。此外，許多系號未能檢測到陽性信號。其中庫安托楊中含5個外源基因的株系有8株，3個外源基因的株系有7株，含2個外源基因的株系有2株，1個外源基因的株系有1株。銀腺雜種楊中含5個外源基因的株系有8株，含4個外源基因的株系有6株，含3個外源基因的株系有6株，2個外源基因的株系有2株，1個外源基因的株系有7株。 3.Southern雜交。依據(jù)點雜交結果，對含有全部外源基因的庫安托楊抗性株進行了Southern