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文檔簡介
1、目的:
1、建立化學損傷誘導的嗅覺障礙大鼠模型,用行為學方法觀察其嗅覺變化。
2、觀察嗅覺恢復過程中大鼠嗅粘膜和嗅球的組織學變化。
3、檢查嗅覺恢復過程中β-Netrin mRNA在大鼠嗅球中的表達變化。
方法:40只出生40d的健康SD大鼠經(jīng)行為學檢查訓練后,隨機取30只以TritonX-100進行造模,造模后次日進行行為學檢查,共獲得24只造模成功的大鼠,將其歸為M組,另10只
2、大鼠用生理鹽水進行假造模,作為對照組。所有大鼠以每6d為一輪,進行行為學檢查。于30d、45d隨機選擇8只M組大鼠處死取材,于60d時處死對照組及剩余8只M組大鼠,分別取嗅粘膜和嗅球進行進一步檢查。嗅粘膜進行HE染色,嗅球則做電鏡和原位雜交檢驗。
結(jié)果:
1、行為學檢查:兩種行為學方法,雙瓶實驗(TBE),埋藏食物小球?qū)嶒?BFPT)均提示大鼠嗅覺逐漸恢復。
2、嗅粘膜和嗅球的組織學檢查顯示Tr
3、itonX-100對嗅粘膜全層均有極大損傷,但損傷可以恢復。嗅球會受到繼發(fā)性損傷,可見線粒體增多,大小不一,線粒體嵴部分缺失,其他細胞器減少。細胞膜部分損傷,胞內(nèi)可見空泡及壞死細胞碎片,細胞連接欠緊密,細胞間隙增寬。
3、原位雜交顯示:30d和45d組均可見中等陽性和強陽性信號成串排列,對照組和60d組可見中等陽性和弱陽性信號散在排列。評分示:對照組得分為3.0±0,30d組為4.75±0.5,45d組為6.5±0.577
4、,60d組為4.25±0.5。經(jīng)單因素方差分析法計算各相鄰組間結(jié)果有統(tǒng)計學差異。
結(jié)論:
1、TritonX-100鼻腔灌注可引發(fā)大鼠嗅覺喪失。TBE及BFPT檢查確切有效。
2、嗅覺、嗅粘膜和嗅球的病理改變均可恢復。
3、β-Netrin mRNA在大鼠嗅球中的表達隨著大鼠嗅覺功能的恢復有一定的變化,表現(xiàn)為陽性信號成串排列且信號增強,其中造模后45d左右較強,提示β-Netrin
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