miR-21靶向PDCD4影響神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞的凋亡.pdf

1、Ⅷ洲』0㈣Y1414208，t京協(xié)和管學院中國蔣學甜辱豫|尊士研究生學位論文北求№和醫(yī)‘畢院研究生院北京協(xié)和醫(yī)學院博士研究生論文中文摘要神經(jīng)膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。盡管在過去的20年中，外科手術(shù)、放療以及化療等醫(yī)療手段不斷進步，但是神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的預后與生存期并未得到明顯的提高。深入了解神經(jīng)膠質(zhì)瘤在侵襲、轉(zhuǎn)移以及凋亡等過程所涉及的分子機制，闡明神經(jīng)膠質(zhì)瘤的發(fā)生與發(fā)展機制，是建立新的神經(jīng)膠質(zhì)瘤分子診斷標準、開發(fā)神經(jīng)膠質(zhì)瘤分

2、子治療技術(shù)的理論基礎(chǔ)。微小時蛆(miIⅢA)是一類內(nèi)源性的非編碼RNA，它們可以直接導致mRNA的降解，或在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控lll】剛A的翻譯。近來研究發(fā)現(xiàn)，miIⅢA參與了細胞中各種基本生命過程的調(diào)控，包括細胞增殖分化、能量代謝和細胞凋亡等，miRNA的異常表達與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。近來研究發(fā)現(xiàn)，miR21在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中異常高表達，敲低其表達能夠有效的激活caspaSe信號通路，促進膠質(zhì)瘤細胞的凋亡。本研究開展了miR2l及其靶基因影響

3、神經(jīng)膠質(zhì)細胞凋亡的分子機制研究。首先，我們利用miRallda’1砷搿Sc鋤和Pictar對miR2l的靶基因進行了生物信息學分析。隨后，我們結(jié)合OMIM數(shù)據(jù)和文獻閱讀分析了候選靶基因與神經(jīng)膠質(zhì)瘤和細胞凋亡的相關(guān)性，篩選出PDCD4、MTAP、SOX5、NTF3、JAGl、RHOB、MAPKl0和NFIB進行了后續(xù)的熒光素酶活性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PDCD4、MTAP、SOX5的3’端非編碼區(qū)(3’UTR)中可能帶有miR21的調(diào)控位點。利

4、用miRanda軟件對PDCD4、MTAP、SOX53’UTR中的miR21結(jié)合位點進行分析，并在不同物種中比較了結(jié)合位點序列的保守性，隨后進行了結(jié)合位點缺失的熒光素酶活性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)PDCD4、MTAP、SOX53’UTR中帶有miR21結(jié)合位點，受到miR2l的調(diào)控。對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系和病理組織的研究發(fā)現(xiàn)，靶基因PDCD4蛋白表達水平與miR21的表達呈負相關(guān)性。利用2’OMeantimiR21敲低神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系T98G中miR