卡介苗防治哮喘作用研究及新型PDE4抑制劑Zl-n-91抗COPD作用的初步探討.pdf

1、cAMP和cGMP能夠介導多種生物反應，如調節(jié)細胞分泌、收縮、代謝和生長等重要的細胞功能，對PKA和：PKG、鳥苷酸交換因子、環(huán)核苷酸門控的鈉通道和鈣通道有調節(jié)作用。調控細胞內的cAMP和cGMP水平能夠對細胞生理產生重要影響。cAMP和cGMP在細胞內的水平主要通過腺苷酸環(huán)化酶和鳥苷酸環(huán)化酶的合成和多種磷酸二酯酶(phosphodiesterase，PDE)的水解來保持。PDE是細胞內存在的一種重要的酶類，分為11個家族，即PDE1-

2、11，可以水解cAMP和cGMP中的磷酸二酯鍵，使其變?yōu)闊o活性的5’—AMP和5’—GMP。抑制磷酸二酯酶可以調節(jié)多種細胞功能，對呼吸系統疾病如哮喘和慢性阻塞性肺病有潛在的臨床應用價值，其中PDE4抑制劑在呼吸系統疾病中的應用尤其受到重視，開發(fā)中的PDE4抑制劑主要包括roflumilast、cilomilast、piclomilast、tetomilst等，其中Roflumilast和Cilomilast最值得關注，已進入臨床Ⅲ期研究

3、，有望用于哮喘和COPD的治療。 分支桿菌是最強的Th1反應誘導劑之一，卡介苗是減毒活牛分支桿菌，最初用作結核疫苗，后來有研究發(fā)現卡介苗能夠調節(jié)Th1/Th2平衡，可以用于預防或治療哮喘，但是卡介苗防治哮喘的機制尚未完全闡明，本論文第一部分以PDE為中心，觀察了卡介苗及其相關成分免疫對哮喘大鼠癥狀的改善作用，并對Th1/Th2平衡以及對肺組織中的PDE活性和表達的影響，同時對cAMP及其信號通路的變化進行了檢測，從而進一步闡明卡

4、介苗防治哮喘的可能機制。 目的：觀察卡介苗免疫對哮喘大鼠模型的治療作用，并研究其可能的作用機制。方法：用OVA致敏并攻擊復制大鼠哮喘模型，同時以卡介苗及其相關成分免疫大鼠，觀察哮喘大鼠肺內的炎癥變化，氣道高反應性改變、Th1/Th2平衡、PDE活性及各PDE家族的表達、cAMP水平以及cAMP下游效應蛋白PKA和Epac1表達水平的變化；并用LPS刺激損傷A549細胞，模擬哮喘組織損傷的細胞模型，同時用卡介苗進行干預，觀察卡介苗

5、對細胞PDE以及PKA、Epac1表達水平的影響，從而推測卡介苗免疫治療大鼠哮喘的可能機制。結果：卡介苗及其相關成分能夠不同程度的減輕哮喘大鼠肺內的炎癥，降低大鼠氣道高反應性，抑制PDE活性和多種PDE的表達水平，降低cAMP和PKA水平，不同濃度的卡介苗也能夠抑制A549細胞的PDE及PKA的表達。結論：卡介苗免疫能夠改善哮喘大鼠的癥狀，而PDE抑制可能是其機制之一，卡介苗或其相關成分可能具有潛在的多重PDE抑制作用。 PDE

6、4抑制劑在COPD治療中的應用也受到了廣泛關注，有臨床數據顯示Roflumilast和Cilomilast這兩個進入臨床Ⅲ期研究的PDE4抑制劑能夠改善COPD患者的呼吸功能和惡化率，并能夠有效改善生活質量。目前治療COPD的方法十分有限，迫切需要開展一些全新的療法，而PDE4抑制劑由于其能夠有效抗炎而成為一類較有前景的COPD治療藥物。本論文第二部分初步研究了一新型PDE4抑制劑Z1—n-91對大鼠COPD模型的治療作用，提示了其可能

7、存在的臨床應用價值。目的：初步探討新型PDE4抑制劑Zl—n-91對于大鼠COPD模型的治療作用，為其將來的臨床應用提供依據。方法：熏煙及氣道滴入LPS復制大鼠COPD模型，并用0.03mg/kg、0.3mg/kg、3mg/kg的Zl—n-91進行治療，觀察大鼠肺內的炎癥變化，PDE4活性變化，肺組織MPO活性和MMP-9水平以及大鼠肺順應性和肺阻力的改變。結果：各濃度的Zl—n-91能夠不同程度的減少COPD大鼠肺組織的炎癥浸潤，有效