Kai1-CD82在大腸癌細胞系的表達及其表達下調機制的初步研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文Kai1CD82在大腸癌細胞系的表達及其表達下調機制的初步研究姓名：楊光之申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學指導教師：丁彥青2002.5.30摘要大腸癌轉移是一個極其復雜的過程，是腫瘤細胞和宿主相互作用的共同結果。Kail基因在這一過程中起抑制作用。f該基因于1995年發(fā)現，其表達產物為CD82，是TM4SF(transmembrane4superfamily)或稱TST(m仃aspantransmembrane)家

2、族成員。該家族結構的最大特點是由4個疏水保守區(qū)構成跨膜區(qū)(transmembrane1transmembrane4，TMITM4)。在TMl與TM2之間、TM3與TM4之間分別有～個較小與較大的膜外半環(huán)樣結構(extracellularloop1、extracellularloop2ECl、EC2)，EC2區(qū)還有3個潛在的糖基結合位點，膜內則有較短的氨基和羧基末端。結構分析提示它在細胞與細胞間粘附、細胞與基質的連接中可能起有一定作用，研

3、究也證實它可以增強腫瘤細胞之間的聚集能力，降低其吞噬能力及侵襲能力，而不影響細胞的增殖力。／。目前研究證實Kail／CD82對多種腫瘤轉移具有抑制作用，但其與大腸癌轉移相關性的研究尚不多，特別是其表達下調的機制未有報道。為探討Kail基因與大腸癌轉移之間的相關性，本研究利用四種不同轉移潛能的大腸癌細胞系HCTll6、HT29、L0v0與SW480，從mRNA與蛋白質水平，用原位核酸雜交、免疫組織化學與WesternBlot三種方法檢測K

4、ail／CD82的表達，得到了一致的結果：Kail／CD82在HT29與SW480細胞系的表達較LoVo與HCTll6為高。為進一步探討Kail基因表達下調的機制，本研究用PCRsSCP技術分析了Kail，CD82表達較低的LoVo與HCTll6細胞系的Kail基因第3一lO外顯子是否存在點突變，檢測Kail基因啟動子區(qū)域CpG島的甲基化狀況，并用免疫組化與WesternBlot等方法研究Kait基因表達與p53異常之間的相關性。實驗結