DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅱ抑制劑以依賴LXR的方式誘導(dǎo)巨噬細胞ABCA1表達及膽固醇外輸.pdf

1、動脈粥樣硬化斑塊的形成是心血管疾病的主要病理之一。富集大量膽固醇和脂質(zhì)的巨噬細胞（亦稱為泡沫細胞）是動脈粥樣硬化斑塊的重要組成成分。因此，維持巨噬細胞內(nèi)膽固醇的動態(tài)平衡對于阻止動脈粥樣硬化斑塊及心血管疾病的發(fā)生發(fā)展至關(guān)重要。膽固醇逆轉(zhuǎn)運是體內(nèi)膽固醇代謝的重要過程，能有效地防止冠心病的發(fā)生。
　　ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A1（ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1）對心血管系統(tǒng)的保護作用已在人

2、類和動物模型中得到驗證。ABCA1利用ATP水解能量，主動、單向地將自由膽固醇和磷脂從巨噬細胞內(nèi)運輸?shù)郊毎饽懝檀冀邮仗幔悄懝檀纪饬髋c逆向轉(zhuǎn)運過程的關(guān)鍵第一步，對初生態(tài)HDL的形成及其代謝過程中起著至關(guān)重要的作用。細胞中ABCA1的水平主要通過轉(zhuǎn)錄來調(diào)節(jié)，特別是通過配體激活的肝X受體，LXR（一種重要的轉(zhuǎn)錄因子）。
　　Teniposide和etoposide是目前已上市的兩種DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅱ的抑制劑。兩者的作用機制類似，均促

3、使酶-DNA斷裂復(fù)合物的形成，使平衡反應(yīng)趨向于酶-DNA斷裂復(fù)合物，延長其半衰期并使其穩(wěn)定。可斷裂復(fù)合物的形成及穩(wěn)定存在促進了DNA的異常重組，從而啟動細胞凋亡程序而導(dǎo)致細胞死亡，因此，此類抑制劑臨床上可應(yīng)用與腫瘤腫瘤。DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅱ與其抑制劑在腫瘤學(xué)和免疫學(xué)得到深入的研究，但是否在其他領(lǐng)域發(fā)揮功能尚不清晰。有報道發(fā)現(xiàn)etoposide可以顯著減緩?fù)弥袆用}硬化進程，但其機理不明，我們認(rèn)為DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅱ的抑制劑可通過調(diào)節(jié)巨噬細胞膽

4、固醇外流及相關(guān)分子的表達，從而抑制巨噬細胞泡沫化并發(fā)揮抗動脈粥樣硬化功能。在此文中，我們通過實驗證實DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅱ抑制劑teniposide和etoposide可以有效地誘導(dǎo)巨噬細胞自由膽固醇外流，這種誘導(dǎo)作用與巨噬細胞ABCA1 mRNA和蛋白上調(diào)相一致。teniposide和etoposide可以誘導(dǎo)ABCA1啟動子活性，這種誘導(dǎo)作用與ABCA1啟動子上的LXRE密切相關(guān)，是以依賴LXR的方式上調(diào)ABCA1啟動子活性。同時EMS

5、A實驗結(jié)果證實，teniposide和etoposide有效增強了LXRE-LXR/RXR復(fù)合體的形成。啟動子實驗及EMSA實驗結(jié)果證明teniposide和etoposide在轉(zhuǎn)錄水平上以LXR依賴的方式誘導(dǎo)ABCA1表達。同時，我們也證實了teniposide和etoposide可以誘導(dǎo)其它LXR靶基因ABCG1和FASN的表達。體內(nèi)實驗證明teniposide和etoposide可以有效地誘導(dǎo)體內(nèi)膽固醇由巨噬細胞向體外的逆轉(zhuǎn)運。<

6、br>　　在本文中，我們還發(fā)現(xiàn)另外一類抗腫瘤藥物MEK1/2抑制劑PD98059和U0126亦可以很好地誘導(dǎo)體外和體內(nèi)巨噬細胞ABCG1的表達和體內(nèi)膽固醇外流。U0126亦可以很好地誘導(dǎo)動脈粥樣硬化斑塊處巨噬細胞中ABCG1的表達。
　　綜上所述，我們的研究結(jié)果證實teniposide和etoposide及其他抗腫瘤藥物可以誘導(dǎo)巨噬細胞膽固醇外流分子的表達及膽固醇外輸，抑制巨噬細胞內(nèi)膽固醇的積累，細胞泡沫化與動脈粥樣硬化的發(fā)展。我