在多藥耐藥機制中Twist與NF-κB、AKT、FHIT表達差異性及相關性研究.pdf

1、User第1頁碩士學位論文在多藥耐藥機制中在多藥耐藥機制中Twist與NFκB、AKT、FHIT表達表達差異性差異性及相關性研究相關性研究院（系）、所院（系）、所基礎醫(yī)學院研究生姓名研究生姓名趙金朋學科、專學科、專業(yè)病理及病理生理學導師姓導師姓名何濤教授二Ο一二年四月目錄User第1頁多藥耐藥多藥耐藥性中Twist與NFκB、AKT、FHIT表達差異性表達差異性、相關性相關性摘要目的目的：本研究為進一步探討Twist在腫瘤細胞對化療藥耐

2、藥機制中作用提供一定線索，采用細胞劃痕、CCk8、免疫組化、RTPCR、Westernblot等技術對照觀察Twist穩(wěn)定轉染的人腎上皮細胞株HEK293Twist和空載體轉染的HEK293vect兩種細胞株對腫瘤化療藥物5氟尿嘧啶（5Fu）、曲古菌素A（TSA）、紫杉醇（Taxol）的敏感性，及在多藥耐藥中Twist與NFκB、AkT、FHIT基因表達差異性。方法：（1）細胞劃痕實驗:先在6孔板背后均勻得劃橫線，間距0.5~1cm，每

3、孔至少穿過5條線。在空中加入約5105個細胞，第2天用槍頭垂于背后的橫線劃痕用滅菌的PBS洗細胞3次，加入無血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，按0，7，24小時拍照。（2）CellCountingKit8，CCK8技術檢測HEK293Twist和HEK293vect兩種細胞株分別對不同濃度TSA、5Fu、Taxol的敏感性，探討這兩種細胞株對化療藥物敏感性差異。設對照組和實驗組，試驗組：HEK293Twist和HEK293vect兩種細胞各設曲古