TLR4-NF-κB通路介導visfatin促內皮炎癥作用研究.pdf

1、研究背景： 動脈粥樣硬化(artherosclerosis，AS)是引起心血管疾病的主要原因之一。目前認為，AS的發(fā)病機制涉及多種因素如氧化、炎癥和免疫系統引發(fā)的全血管生物學病理改變。內臟脂肪素(visfatin)是最新發(fā)現的脂肪細胞因子，與先前在淋巴細胞中發(fā)現的前B細胞集落增強因子(pre-B cell colony-enhancing factor，PBEF)結構一致，不僅參與代謝的調節(jié)，也是一種前致炎因子。新近研究顯示，v

2、isfatin能誘導內皮功能障礙和促進AS的發(fā)展。Toll樣受體4(toll like receptor4，TLR4)在免疫和炎癥反應中扮演著十分重要的角色。研究顯示，TLR4能激活核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)信號通路并介導多種脂肪細胞因子的致炎作用。因此，本實驗旨在觀察visfatin對內皮炎癥反應的影響并探討其作用是否與激活TLR4-NF-κB信號通路有關。 方法： 培養(yǎng)人臍靜脈內皮

3、細胞(HVUECs)，給與不同濃度visfatin(0.1，1，10 nM)孵育6-48 h；實時定量PCR檢測內皮細胞TNF-αmRNA的表達；ELISA法檢測內皮細胞培養(yǎng)液中TNF-α和MCP-1的含量；電泳遷移率變更分析內皮細胞NF-κB活性；培養(yǎng)單核細胞株THP-1，計數法檢測單核-內皮細胞黏附率。 結果： (1)Visfatin能濃度和時間依賴性增加內皮細胞TNF-α mRNA的表達以及培養(yǎng)上清液中TNF-α和

4、MCP-1的含量。同時，visfatin能濃度依賴性增加單核-內皮細胞黏附； (2)Visfatin(0．1-10 nM)孵育24 h能顯著上調內皮細胞TLR4 mRNA的表達，且呈濃度依賴性；而且，visfatin也能呈濃度依賴性激活內皮細胞NF-κB： (3)TLR4抗體能顯著抑制visfatin(10 nM，24 h)誘導的NF-κB激活，TNF-α、MCP-1的增加和單核-內皮細胞黏附率的增加。 結論：