急性心肌缺血誘發(fā)大鼠背根神經節(jié)、脊髓及外周臟器孤啡肽（OFQ）表達的變化及藥物干預研究.pdf

1、本文研究目的：主要觀察急性心肌缺血作為傷害性刺激誘發(fā)心肌損傷時，孤啡肽在背根神經節(jié)、脊髓、心肌和小腸組織內的表達變化，并觀察預先給予嗎啡、艾司洛爾、羅哌卡因等藥物干預的效應。探討孤啡肽在急性心肌缺血誘發(fā)神經源性反應中的作用及其機制。 研究方法： 第一部分：急性心肌缺血后OFQ的表達變化實驗選用雄性SD大鼠隨機分為三組： (1)空白對照組(Control group，C組)，麻醉后直接取材； (2)假手術組(Sha

2、m group， S組)，只開胸暴露心臟不結扎冠脈；(3)結扎冠狀動脈組(Coronarv arterv occlusion group，CAO組)，單純扎閉冠狀動脈左前降支。其中，Sham組和CAO組又分為四個時點的亞組：0.5h組、1h組、3h組、6h組，每組大鼠均為6只。采用免疫組化觀察并分析結扎大鼠冠狀動脈不同時點背根神經節(jié)、脊髓、心肌和小腸等組織內OFQ的表達變化情況；應用實時熒光定量PCR對比分析不同時點脊髓和背根神經節(jié)內p

3、reproOFQ mRNA的表達水平。 第二部分：硬膜外及靜脈預先給藥后OFQ的表達變化的研究根據(jù)第一部分實驗結果，分別選取CAO后OFQ表達最強的時點進行藥物干預研究。采用雄性SD大鼠隨機分為六組：(1)假手術組(Sham group，S組)；(2)結扎冠狀動脈組(Coronary artery occlusion group，CAO組)；(3)青爭脈注射嗎啡組(Intravenous injection Morphine g

4、roup，I-M組)；(4)靜脈注射艾司洛爾組(Intravenous injection Esmolol group，I-E組)；(5)硬膜外羅哌卡因預處理組(Epidural Ropivacaine group，E-R組)；(6)硬膜外嗎啡預處理組(Epidural Morphine group，E-M組)。各藥物干預組分別在結扎左冠狀動脈前15min經尾靜脈給予嗎啡1.25mg．kg<'-1>、艾司洛爾3.0mg．kg<'-1>；

5、經硬膜外給予嗎啡60μg．kg<'-1>、1％羅哌卡因120μg．kg<'-1>。采用免疫組化、ELISA和實時熒光定量PCR等技術從蛋白和mRNA水平對比分析各藥物的干預效應。 研究結果：(1)結扎冠狀動脈左前降支后大鼠脊髓、背根神經節(jié)、心肌和小腸組織內OFQ水平較C組、S組顯著升高(P<0.05)，心肌、小腸內OFQ的表達在CAO3h達高峰(P<0.01)，心肌缺血區(qū)OFQ水平與非缺血區(qū)心肌比較無顯著性差異；背根神經節(jié)及脊髓

6、OFQ在CAP1h達高峰(P<0.01)，脊髓背角和腹角OFQ水平比較無顯著性差異；各藥物干預組OFQ水平明顯低于CAO組(P<0.05)； (2)在脊髓和背根神經節(jié)，CAO各組preproOFQ mRNA的表達水平均較較C組、S組增高(P<0.05)，CAO1h組表達最為顯著(P<0.01)；各藥物干預組明顯低于CAO組(P<0.05)，各藥物干預組之間差異無顯著性，與蛋白水平變化一致。 研究結論： (1)結扎冠狀動脈左前降支

7、后大鼠背根神經節(jié)、脊髓、心肌及小腸OFQ水平明顯升高，提示：急性心肌缺血作為一種傷害性刺激可能誘發(fā)、激活了機體神經源性反應機制；OFQ可能在這種神經源性機制中發(fā)揮了作用； (2)心肌缺血刺激可誘發(fā)心肌組織和遠位器官內OFQ變化；(3)嗎啡、艾司洛爾預先靜脈給藥、硬膜外給予嗎啡或羅哌卡因均可顯著降低結扎冠狀動脈誘發(fā)的大鼠背根神經節(jié)、脊髓、心肌及小腸OFQ的表達。提示：神經機制參與介導心肌缺血反應；體內阿片類、腎上腺素能機制和脊髓內阿片類機