鈣離子對GHS大鼠腎小管上皮細胞cbfα1和osterix表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討鈣離子對GHS大鼠腎小管上皮細胞cbfα1和osterix轉錄因子表達的影響及其是否存在類似血管異位鈣化的相關調控機制。
　　方法：原代培養(yǎng)GHS大鼠腎小管上皮細胞,待其生長成片時轉入培養(yǎng)板中,加入不同濃度的鈣溶液共同孵育12、24和48小時。實驗共分五組:陰性對照組(+PBS);鈣I組(+0.5mmol/LCa2+);鈣II組(+1.0mmol/LCa2+);鈣III組(+1.5mmol/LCa2+);鈣IV組(+2.

2、0mmol/LCa2+)。各組均采用RT-PCR檢測cbfα1和osterixmRNA的表達,westernblotting法測定其蛋白質表達。
　　結果：RT-PCR:鈣離子處理GHS大鼠腎小管上皮細胞24h,鈣I~IV組cbfα1基因mRNA相對表達量分別是陰性對照組的1.25倍、1.58倍、1.92倍和1.82倍。鈣II~IV組vs對照組(P﹤0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣I~IV組oste

3、rix基因mRNA相對表達量分別是陰性對照組的1.41倍、1.60倍、2.13倍和1.85倍。鈣I~IV組vs對照組(P﹤0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。Westernblotting:鈣離子刺激24h鈣I~IV組cbfα1蛋白相對表達量分別為0.98±0.11,1.15±016,1.38±0.27,1.24±0.21,而陰性對照組為0.81±0.11;鈣II~IV組vs對照(P<0.05);鈣III組vs

4、鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣I~IV組osterix蛋白相對表達量分別1.40±0.25,1.58±0.33,1.92±0.43,1.73±0.38,而陰性對照組1.20±0.20;鈣II~IV組vs對照組(P<0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣III(1.5mmol/lCa2+)組cbfα1和osterixmRNA和蛋白相對表達量0~24h逐漸升高,24h達峰值(P<0.05),24~48h逐漸

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