nm23-H1抑制乳腺癌機理的研究.pdf

1、　　目的：探討nm23—H1基因對乳腺癌細胞的抑制作用及機理,為nm23—H1的基因治療提供依據。
　　方法：利用人nm23—H1基因與真核表達質粒pcDNA3.1(-)構建成重組表達質粒pcDNA3.1-NMH1后,分別以pcDNA3.1-NMH1合并脂質體共轉化人乳腺癌MCF-7S細胞和人臍靜脈內皮ECV-304細胞；經G418篩選出nm23-H1穩(wěn)定表達的細胞株后,檢測nm23-H1對乳腺癌MCF-7S細胞及人臍靜脈內皮細胞

2、ECV-304細胞增殖能力、克隆形成率、移動能力的影響；同時,用RT-PCR驗證人臍靜脈內皮細ECV-304的nm23—H1基因內轉錄表達水平,并通過透射電子顯微鏡與免疫組織化學的方法分別檢測、探究nm23—H1及nm23-H1/NDPK-A對人臍靜脈內皮細胞ECV-304的作用部位,從而進一步探討nm23—H1基因對乳腺癌細胞的抑制作用機理。
　　結果：與對照組相比,轉入nm23-H1基因的人乳腺癌細胞MCF-7S和人臍靜脈內皮

3、細胞ECV-304的對數(shù)生長期延長,細胞增殖速度減慢,移動距離縮短,克隆形成率降低；并且,nm23—H1在細胞ECV-304中轉錄水平有表達,同時nm23—H1所表達的蛋白NDPK-A主要在胞漿；而且,轉染nm23—H1后的ECV-304細胞呈現(xiàn)線粒體數(shù)量減少、腫脹、固縮、嵴變形甚至消失。
　　結論：nm23—H1基因抑制乳腺癌的機制與其對乳腺癌細胞的增殖能力、克隆形成率以及移動能力的抑制密切相關；這又與其對血管內皮細胞增殖、遷移