高分辨率熔解曲線分析檢測常見β-地中海貧血突變的方法學建立及其在產前診斷中的應用.pdf

1、目的：
　　β-地中海貧血是最常見的單基因遺傳病之一,重型β-地中海貧血死亡率極高,預防該病主要依賴于基因診斷,但常用的反向斑點雜交法耗時長、結果不穩(wěn)定,有時出現假陽性與假陰性,而高分辨率熔解曲線分析(HRM)具有快速、靈敏度高、價格低廉等優(yōu)點。本研究旨在建立檢測常見β-地中海貧血突變的HRM方法,并進一步探討該方法在產前診斷應用的可行性,以期建立β-地中海貧血產前基因診斷的第二技術驗證平臺。
　　方法：
　　1.選取

2、1例經測序證實的無β-珠蛋白基因突變的健康對照者、21例經測序證實基因型為-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42,-28/CD17、-28/IVS-Ⅱ-654、-28/CDs71-72的基因組DNA,建立應用HRM檢測常見β-地中海貧血基因突變的方法。
　　2.應用建立的HRM方法隨機檢測78例父母雙方均為β-地中海貧血突變攜帶者的產前診斷標

3、本(羊水、臍血、絨毛),同時行反向斑點雜交法(RDB)及DNA測序對比實驗。
　　結果：
　　1.所建立的HRM法能準確檢測出21例β-地中海貧血突變,包括-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42等
　　2.HRM法對78例父母雙方均為β-地中海貧血基因攜帶者的產前診斷標本進行檢測,結果顯示:與RDB法及DNA測序結果一致,且通過測