吡格列酮對高糖高胰島素誘導的肥大心肌細胞抑制作用的實驗研究.pdf

1、目的：高糖高胰島素血癥是2型糖尿病的重要特征，近年來它們在糖尿病并發(fā)心肌肥大過程中的作用逐漸得到證實，而新型噻唑烷二酮類口服降糖藥-吡格列酮對心肌肥大有明顯的治療作用，但其作用機制尚不清楚。心肌營養(yǎng)素-1(cardiotrophin-1，CT-1)是IL-6家族中一種具有強大致心肌肥大作用的因子，因而，我們設計了本實驗觀察心肌營養(yǎng)素-1在高糖高胰島素誘導的肥大心肌細胞中的表達，以及吡格列酮對其表達的影響，以探討心肌營養(yǎng)素-1在糖尿病心肌

2、肥大發(fā)生中的作用和吡格列酮治療的作用途徑。 方法：體外原代培養(yǎng)新生大鼠心肌細胞，并經免疫細胞化學鑒定。然后將培養(yǎng)的新生大鼠心肌細胞隨機分為四組：正常對照組，模型組，模型治療組，給去甲腎上腺素的陽性對照組。給藥后分別檢測各組心肌細胞肥大的指標：用圖像分析儀測定心肌細胞的表面積，用考馬斯亮藍法測定心肌細胞蛋白含量，用半定量RT-PCR法檢測肥大心肌細胞的特征性基因-心房利鈉因子mRNA的表達。同時用半定量RT-PCR法檢測心肌營養(yǎng)

3、素-1 mRNA的表達。 結果：1.心肌細胞表面積：模型組心肌細胞表面積顯著高于正常對照組，增加了28％(P<0.01)，而吡格列酮治療組心肌細胞的表面積降低了9％(P<0.01)。此外，陽性對照組的心肌細胞表面積較對照組也顯著增大，增加了34％(P<0.01)。2.心肌細胞的蛋白含量：處理因素作用48h后，測定各組心肌細胞的蛋白含量。與正常對照組相比，模型組和陽性對照組心肌細胞總蛋白含量均顯著升高(P<0.01)，而治療組相對

4、于肥大組顯著降低(P<0.05)。3.ANF mRNA表達：半定量RT-PCR分析表明，模型組和陽性對照組的ANF mRNA表達相對于正常對照組顯著升高(P<0.01)，而吡格列酮治療組較模型組顯著降低(P<0.01)。4.CT-1mRNA表達：半定量RT-PCR結果顯示，模型組和陽性對照組的CT-1mRNA表達相對于正常對照組顯著升高(P<0.01)，而吡格列酮治療組較模型組顯著降低(P<0.05)。 結論：高糖高胰島素誘導的