BRL37344對(duì)3T3-L1細(xì)胞脂肪分解及瘦素、TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、目的：肥胖已成為嚴(yán)重影響人類健康的世界公共衛(wèi)生問(wèn)題，與2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)、高血壓、冠心病、腫瘤等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但目前對(duì)于肥胖的病因、發(fā)病機(jī)制仍有待研究，且缺少直接有效的治療手段。選擇性β3-腎上腺素受體激動(dòng)劑(β3-adrenergic receptor agonist，β3-ARa)能夠增加嚙齒類動(dòng)物白色脂肪組織(white adipose tissue，WAT)的脂質(zhì)

2、分解與棕色脂肪組織(brown adipose tissue，BAT)的非顫栗性產(chǎn)熱，降低體脂含量，為肥胖的治療提供了新的思路。脂肪組織是能量?jī)?chǔ)存器官，也是人體最大的內(nèi)分泌組織，其分泌的許多脂肪細(xì)胞因子對(duì)體內(nèi)能量平衡、糖脂代謝有不可或缺的作用。本研究旨在通過(guò)觀察選擇性β3-ARa BRL37344對(duì)分化成熟的3T3-L1脂肪細(xì)胞脂肪分解及與脂代謝相關(guān)的脂肪細(xì)胞因子瘦素、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-αTN

3、F-α)表達(dá)分泌的影響，進(jìn)一步明確β3-ARa改善脂代謝降低體重的效應(yīng)，并探討其作用機(jī)制。
　　方法：在37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞，采用含有胰島素、地塞米松及3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(3-isobuty1-1-methylxanthine，IBMX)的分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)其分化成熟，通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài)與油紅O染色鑒定細(xì)胞。脂肪細(xì)胞分化成熟后，采用不同濃度(0、10-9、10-7mol/L)與不同作用時(shí)間(0、12

4、、24、48h)的BRL37344干預(yù)，收集細(xì)胞及培養(yǎng)基于-80℃凍存。通過(guò)比色法測(cè)定培養(yǎng)基中的甘油含量作為評(píng)價(jià)脂肪分解的指標(biāo)，采用RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)瘦素、TNF-αmRNA的表達(dá)，ELISA法測(cè)定培養(yǎng)基內(nèi)瘦素、TNF-α的蛋白含量。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和方差分析，P<0.05顯示差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度(10-9、10-7mol/L)

5、與作用時(shí)間(12、24、48h)的BRL37344均顯著增加3T3-L1脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)的甘油含量，增高水平呈劑量與時(shí)間依賴性。最大刺激作用為10-7mol/L BRL37344干預(yù)48h，甘油含量較對(duì)照組增加了95～102％(P<0.01)。
　　2.不同濃度(10-9、10-7mol/L)的BRL37344均抑制3T3-L1脂肪細(xì)胞瘦素、TNF-α的表達(dá)與分泌，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨著濃度的增加，瘦素、TNF-α的表達(dá)、分泌量

6、降低的更為顯著，10-7mol/L BRL37344干預(yù)48h時(shí)達(dá)最低水平，瘦素、TNF-αmRNA的表達(dá)量分別降低了97％(P<0.01)、130％(P<0.01)，分泌量則分別下調(diào)了48％(P<0.01)、95％(P<0.01)。
　　3.10-7mol/L的BRL37344干預(yù)3T3-L1脂肪細(xì)胞12h后，瘦素、TNF-α的表達(dá)、分泌量與干預(yù)前相比無(wú)明顯變化(P>0.05)，干預(yù)24h后可表現(xiàn)出顯著的抑制作用，48h后達(dá)到最

7、低水平，瘦素、TNF-αmRNA的表達(dá)量分別降低了119％(P<0.01)、158％(P<0.01)，分泌量則分別下調(diào)了50％(P<0.01)、92％(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.BRL37344能夠顯著增加脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)分解，減少細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)含量。
　　2.BRL37344能夠增加脂肪細(xì)胞對(duì)瘦素、TNF-α的敏感性，改善其抵抗引起的代謝紊亂，促進(jìn)其減重作用的發(fā)揮。BRL37344與脂肪細(xì)胞內(nèi)分泌功能之間的相