原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞檢測及其臨床意義.pdf

1、目的：乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，在我國其發(fā)病率正在逐年上升，且發(fā)病年齡正在趨向年輕化，盡管目前的綜合治療方法顯著改善了患者的生存期，但乳腺癌的復發(fā)和轉移風險仍然很高。目前越來越多的證據顯示，腫瘤組織中腫瘤干細胞的存在及數量是腫瘤復發(fā)和轉移的根源，并且對判斷病情進展和預后具有重要參考價值。但腫瘤干細胞缺乏特異的標志物對其檢測，最近國外的研究發(fā)現(xiàn)，CD55可以作為乳腺癌干細胞的標志物，并可作為判斷病情進展狀況和預后的重要參考指標。本

2、實驗擬采用流式細胞術檢測乳腺癌組織中乳腺癌干細胞（Mammary Cancer Stem Cells MCSC）的存在及比例，并分析其與臨床病理因素：臨床分期、病理類型、腋淋巴結轉移情況及受體試驗結果（C-erbB2、ER、PR），Ki67的關系，探討CD55高表達（CD55hig）與乳腺癌預后的關系，為臨床上對乳腺癌患者的病情估計、預后判斷及指導乳腺癌的合理治療提供一定理論依據。
　　 方法：選取2008年2月至2009年1月

3、在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院外一科診治的乳腺癌患者45例，年齡30～72歲，中位年齡46歲。其中8例曾行過術前新輔助化療，其余為首次就診、未經過任何治療的病人。其中根據腋淋巴結有無轉移分為：無轉移者16例，淋巴結轉移1-3枚16例，淋巴結轉移≥4枚13例；根據病理類型分為：浸潤性導管癌33例，浸潤性小葉癌7例，其他類型乳腺癌5例；根據臨床分期分為：Ⅰ期11例，Ⅱ期26例，Ⅲ期8例；根據C-erbB2表達情況分為：陽性（+～+++）患者33例，

4、陰性（-）患者12例；根據ER表達情況分為：陽性（+～+++）患者30例，陰性（-）患者15例；根據PR表達情況分為：陽性（+～++）患者26例，陰性（-）患者19例；根據Ki67表達情況分為：陽性（+～+++）患者32例，陰性（-）患者13例。
　　 本試驗采用CD55，CK19雙抗對原發(fā)性乳腺癌單細胞懸液進行免疫熒光標記，以流式細胞學方法進行檢測，取超出相對應的腫瘤5厘米的非癌乳腺組織作為免疫熒光標記時的陰性對照，檢測中以乳

5、腺癌細胞株所測的CD55hig的熒光密度值為界（本研究采用MDA-MB-231細胞株進行CD55檢測，以此癌細胞表面受體大量結合CD55抗體的主峰處的熒光密度值為界值，超出此界值即為CD55hig），設門分析，獲取門內CD55高表達（CD55hig）群細胞的比例。實驗結果用Expo32 ADC軟件進行分析，得到CD55高表達群細胞的比例。
　　 結合患者的臨床資料、病理類型、腋淋巴結轉移狀況及C-erbB2等因素進行相關分析。腫

6、瘤的各項病理指標根據我院組織活檢和手術標本的病理報告確定，患者的臨床資料來自住院病歷。
　　 統(tǒng)計分析運用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析實驗數據。實驗結果以x±S表示。兩個樣本均數的比較應用秩和檢驗（Wilcoxon符號秩檢驗），多組樣本均數的差別比較應用秩和檢驗（Kruskal-Waillis H檢驗）。以α=0.05為檢驗水準。
　　 結果：
　　 1.本實驗測得原發(fā)性乳腺癌腫瘤組織中CD55hig的細胞比例均

7、數為0.21％±0.20。
　　 2.CD55hig的細胞比例在腋淋巴結無轉移組、1～3個腋淋巴結轉移組及≥4個腋淋巴結轉移組之間進行兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P=0.000）。
　　 3.本試驗發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌腫瘤組織中C-erbB2（-）組的CD55hig的細胞比例為0.028±0.005，較C-erbB2（+～+++）組的CD55hig的細胞比例0.277±0.034，有明顯的下降，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.0

8、00）。
　　 4.乳腺癌不同病理類型之間的CD55hig的細胞比例無統(tǒng)計學差異。
　　 5.CD55hig的細胞比例在乳腺癌患者臨床分期之間的差異無統(tǒng)計學意義。
　　 6.CD55hig的細胞比例在乳腺癌組織中ER（-）、 ER（+～+++）組間，PR（-）、PR（+～+++）組間，Ki67（-）、Ki67（+～+++）組間比較，差異無統(tǒng)計學意義。
　　 7.本研究發(fā)現(xiàn)，CD55hig的細胞比例在術前化

9、療組與未化療組的比較中無統(tǒng)計學差異。
　　 結論：
　　 1.本研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌腫瘤組織中代表乳腺癌類干細胞的CD55hig細胞的均數比例為0.21％±0.20。
　　 2.原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞的比例在相對應的腋淋巴結無轉移組，1～3個腋淋巴結轉移組及≥4個腋淋巴結轉移組之間進行兩兩比較，均有統(tǒng)計學差異，提示原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞的比例與乳腺癌患者病灶的轉移和病情的進展有一定的相關性。
　　 3.

10、原發(fā)性乳腺癌組織中C-erbB2表達陽性組的乳腺癌類干細胞比例與C-erbB2（-）組比較有明顯上升，有統(tǒng)計學差異，提示在侵襲性強的乳腺癌組織中乳腺癌類干細胞比例增高。
　　 4.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞比例在不同病理類型乳腺癌組織間有明確的相關性。
　　 5.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞比例與不同臨床分期的乳腺癌病人有明確相關性。
　　 6.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細胞比例在乳