酪絲亮肽多囊脂質體的研究.pdf

1、酪絲亮肽(Tyroserlenutide，YSL)為具有生物活性的小分子三肽，由三個氨基酸所組成，分子式為C18H27N3O6，其化學結構為L-酪氨酰-L-絲氨酰-L-亮氨酸。藥效學實驗表明，酪絲亮肽可明顯抑制人肝腫瘤細胞Be17402在體內外的生長，通過調節(jié)細胞內Ca2+濃度影響信號轉導系統(tǒng)，誘導腫瘤細胞的凋亡和壞死而達到抗腫瘤效果，且無明顯毒副作用。酪絲亮肽在體內很快被降解，血漿半衰期短，需要每日注射一次，注射30天為一個療程。為了

2、減少給藥次數(shù)，延長藥物體內作用時間和延長藥效，在制劑學上可采用緩釋或控釋技術控制藥物的釋放。本文從制劑學角度出發(fā)，對YSL進行了制劑學研究，期望制備出具有緩釋功能的酪絲亮肽多囊脂質(Tyroserlenutide-Multivesicular liposome，YSL-MVL)，并對其基本理化性質進行初步考察。本文主要研究內容及結果如下： 首先本文對YSL進行了處方前研究，采用等電聚焦法測定了YSL的等電點為4.8。初步對YSL

3、的溶解性能進行考察，結果表明YSL易溶于冰醋酸，溶解于水，在乙醇中微溶，極微溶于四氫呋喃，不溶于乙醚和氯仿，YSL在50 mmol/L pH4.0的醋酸鹽緩沖液中的溶解度最大為21.670mg/ml，在pH5.0～7.5范圍內溶解度為17.627mg/ml。同時測定了YSL的表觀油水分配系數(shù)為0.035，藥物親水性強。 建立了YSL的HPLC的測定方法，測定檢測限為2ng，定量檢測限為6ng，在2.00～50.00μg/mL線性

4、關系良好。 采用析因實驗設計法對YSL在溶液中的穩(wěn)定性影響因素進行考察，測定YSL在不同條件下的降解速率常數(shù)k及降解半衰期t1/2，結果表明溶液中的pH值、緩沖鹽種類、緩沖鹽離子濃度及溫度對藥物的穩(wěn)定性影響嚴重。溫度升高時YSL降解加快；YSL在ABS中表現(xiàn)出最高的穩(wěn)定性，而在PBS中穩(wěn)定性降低，在CBS中最不穩(wěn)定，在ABS、PBS和CBS中YSL的最適pH值分別為4.08、4.02和8.08；氧氣的存在可能協(xié)同pH值的改變而間

5、接影響藥物穩(wěn)定性，YSL在溶液中的降解符合一級動力學方程。 其次，在處方前研究的基礎上，對YSL-MVL的處方組成和制備工藝進行研究。選擇以SPC、CH、OA和TO為主要脂質材料制備MVL，以單因素實驗和正交實驗設計優(yōu)選出處方油相中SPC用量為16.5mg/mL，CH用量為8.0mg/mL，TO用量為8.0mg/mL，OA用量為1.0mg/mL；篩選內水相使用50mmol/L的pH4.0的ABS緩沖鹽，YSL濃度為10mg/mL

6、，內水相蔗糖濃度7.5％；外水相為40mmol/L的L-賴氨酸，5％Sucrose，pH9.27；分散介質為pH7.00的50 mmol/LABS溶液，蔗糖濃度為5％。對制備工藝進行單因素實驗篩選，最終選擇油相與內水相比為1:1；初乳制溫度為10～25℃；初乳剪切轉速為9000rpm，剪切時間10min；初乳與外水相比例為1:4；復乳剪切速度為3000rpm，剪切時間10sec；選擇以氮氣吹除氯仿；選擇以2500rpm離心10min沉淀

7、MVL。 最后，對YSL-MVL的基本理化性質做了初步研究，測定最佳處方工藝條件下制備的YSL-MVL的平均粒徑大小為17.23μm，粒徑分布均勻，88.57％粒徑分布在10～30μm范圍，包封率為90.8％，粒子表面荷負電，zeta電位為(-44.53±4.10)mv?？疾炝薡SL-MVL的釋放及影響其釋放的環(huán)境因素和處方因素，確定其釋放機制主要包括溶蝕和擴散過程。初步考察YSL及YSL-MVL在血漿中的穩(wěn)定性，結果表明YSL