胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在仿刺參再生過(guò)程中的表達(dá)分析.pdf

1、胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在動(dòng)物的許多生理過(guò)程中起著十分重要的作用，包括創(chuàng)傷修復(fù)，炎癥反應(yīng)，凝血反應(yīng)，再生等功能。
　　 本文通過(guò)基因克隆(RACE)技術(shù)首次獲得了仿刺參胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶的全長(zhǎng)cDNA序列，該序列含有1216bp堿基對(duì)，5’端有39bp的非編碼區(qū)，3’端有355bp的非編碼區(qū)。通過(guò)基因步移的實(shí)驗(yàn)手段得到了胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因包括內(nèi)含子和外顯子在內(nèi)的DNA序列，該序列包括含有4個(gè)內(nèi)含子序列和5個(gè)外顯子序列。

2、用原位雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在不同組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在體壁，腸，呼吸樹等組織中均有分布，其中在腸中的信號(hào)最強(qiáng)。用Realtime-PCR技術(shù)分別檢測(cè)胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在不同組織的不同再生階段的表達(dá)模式。結(jié)果顯示在再生一小時(shí)內(nèi)的體壁中，胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因呈現(xiàn)出短暫并明顯的上調(diào)趨勢(shì)，接著表達(dá)量下調(diào)，隨著組織的再生，胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因表達(dá)量上調(diào)，最后達(dá)到正常水平。在腸和呼吸樹中，

3、胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因的表達(dá)量隨著組織的再生呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)。但是在這些組織中胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因的表達(dá)量一直低于正常水平直到再生出新組織表達(dá)量恢復(fù)到正常水平。胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在仿刺參不同再生階段的表達(dá)量的變化表明其在再生過(guò)程中起著重要的作用。
　　 對(duì)仿刺參胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在其不同再生過(guò)程中表達(dá)模式的研究對(duì)于闡明仿刺參再生調(diào)控通路和相關(guān)分子機(jī)制的有著重要意義。同時(shí)，對(duì)于進(jìn)一步了解仿刺參苗種生產(chǎn)和養(yǎng)殖