益腎蠲痹丸對 KOA模型家兔軟骨中 NO、NOS水平影響的實驗研究.pdf

1、　　目的：本課題以中醫(yī)理論為指導,結合現(xiàn)代醫(yī)學及實驗理論知識,觀察益腎蠲痹丸對膝骨關節(jié)炎(KOA)模型家兔軟骨中 NO、NOS 水平的影響,從而探討其防治KOA的作用及機制。
　　方法：實驗用新西蘭大白兔36(+3)只,雌雄各半。隨機分為模型組(生理鹽水組)、對照組(硫酸氨基葡萄糖組)及實驗組(益腎蠲痹丸組) ,每組 12 只；3 組家兔均采用 Hulth 法建立 KOA 模型,按 Meeh-Rubner 公式：A(體表面積)

2、=K(系數(shù))·W(體重g)2/3·10-4計算體表面積,折算后給兔灌服；模型復制成功后開始給藥,實驗組給予益腎蠲痹丸,對照組給予硫酸氨基葡萄糖,模型組給予等量的生理鹽水灌服；于治療后第2w、6w、10w分3批(每批每組4只)處死家兔,迅速取出股骨內側髁矢狀剖面標本2塊：一塊用1/1000的分析天平稱取軟骨質量 200mg,用組織勻漿器研碎后加入9.0g/L氯化鈉注射液制成質量分數(shù)為10%的組織勻漿,放入4℃冰箱16~18h,再置于-20

3、℃保存?zhèn)溆茫灰粔K用體積分數(shù)為10%甲醛固定,10%硝酸脫鈣,經石蠟包埋、切片后,應用常規(guī)蘇木素—伊紅(HE)染色、番紅O及甲苯胺藍兩種軟骨基質組織化學染色；NO、NOS 代謝水平的影響用 NO、NOS 試劑盒檢測顯示；病理損傷依Mankin法進行KOA評分并分級。
　　結果：①大體觀各組家兔在造模后即出現(xiàn)跛行,治療組在治療后跛行的數(shù)量逐漸少于其它組；模型組家兔體重在10w時明顯低于對照組及實驗組,實驗組家兔較治療前體重增加量大

4、于對照組。②在相應的療程后,取材分離股骨髁,肉眼觀察治療組關節(jié)軟骨及滑膜結構優(yōu)于對照組,模型組最差；依 Mankin 法進行評分,治療2w后對照組、治療組評分與模型組組間比較無顯著性差異(P>0.05),對照組、治療組組間比較無顯著差異(P>0.05)；治療6w后,對照組、治療組評分與模型組組間比較有顯著性差異(P<0.05),對照組、治療組組間比較無顯著性差異(P>0.05)；治療10w后,對照組、治療組評分與模型組相比有顯著性差異(

5、P<0.05),對照組、治療組組間比較有顯著性差異(P<0.05)；③關節(jié)軟骨中NO、NOS含量檢測：治療2w 后對照組、治療組關節(jié)軟骨中 NO、NOS 含量與模型組組間比較無顯著性差異(P>0.05),對照組、治療組組間比較無顯著差異(P>0.05)；治療6w后,對照組、治療組關節(jié)軟骨中NO、NOS含量與模型組組間比較有顯著性差異(P<0.05),對照組、治療組組間比較無顯著性差異(P>0.05)；治療10w后,對照組、治療組關節(jié)軟骨

6、中NO、NOS含量與模型組相比有顯著性差異(P<0.05),對照組、治療組組間比較有顯著性差異(P<0.05)；
　　結論：造模2w即有早期骨關節(jié)炎改變,6w為中期,10w為晚期；血清NO、NOS水平于造模后 6w 內急劇升高,以后進入平臺期；隨著病理分級增加,Mankin 評分升高,軟骨凋亡率相應增加；益腎蠲痹丸能夠有效調節(jié)NO、NOS水平,進而調整軟骨的代謝與修復,減輕軟骨的損傷,有效防止關節(jié)軟骨的退變,對KOA有一定的防