紫外線輻射角質形成細胞導致皮膚光老化的分子機制研究.pdf

1、目的:研究紫外線輻射對體外培養(yǎng)的角質形成細胞的影響,包括對角質形成細胞增殖、凋亡和死亡的影響,以及與凋亡相關的bcl-2和Fas基因之間的關系;對角質形成細胞分泌炎癥性細胞因子IL-6和表達核因子-κ B(NF-κ B)的影響;以及紫外線輻射后表皮角質形成細胞產(chǎn)生的細胞因子IL-6對真皮成纖維細胞產(chǎn)生基質金屬蛋白酶MMP-1和MMP-3的間接影響.研究具有抗氧化、抗炎作用的綠茶中的主要活性成分表沒食子兒茶酚沒食子酸酯(EGCG)對紫外線

2、輻射造成角質形成細胞損傷的保護作用.研究NF-κ B、表皮生長因子受體(EGF-R)反義寡核苷酸分別轉染體外培養(yǎng)的表皮角質形成細胞株HaCaT后,對紫外線誘導的表皮角質形成細胞分泌炎癥因子IL-6的抑制作用和轉錄因子c-jun活性的抑制作用.通過這一系列紫外線輻射對表皮角質形成細胞影響的研究,進一步明確紫外線引起皮膚光老化的分子機制,以期探討防治紫外線引起皮膚光老化的新途徑.方法:MTT法測定細胞增殖,流式細胞儀檢測凋亡和死亡細胞數(shù)量以

3、及bcl-2蛋白水平的變化,ELISA方法測定細胞培養(yǎng)上清液中IL-6、Pro-MMP-1、MMP-3蛋白含量和c-jun DNA結合活性,半定量RT-PCR檢測mRNA的表達水平,免疫組化和Western Blot檢測細胞中NF-κBp65.結論:紫外線輻射對細胞具有明顯的損傷,小劑量UVB輻射可以誘導體外培養(yǎng)的角質形成細胞凋亡,大劑量UVB輻射則導致細胞死亡.紫外線輻射后,角質形成細胞NF-κB激活,易位到細胞核,并且促進IL-6的