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1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文高賴氨酸蛋白基因在轉(zhuǎn)基因生菜中的表達(dá)和遺傳研究姓名：李興濤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：張金文劉玲20050601AbstraetVariousfactorsinfluencingtissuecultureoflettuce(LactucasativaL)wereinvestigatedandatransformationsystemwasestablishedwithexplantTransge
2、niclettucewasobtainedbyAgrobacteriumtumefaciecsmediatedtransformationofleafdiscLysinerichproteingenewasintroducedintolettuce，TheresultsindicatedthattheintroducedgenewasintegratedintotheTOandTlgenerationtransgenicplantsAn
3、efficientgenetransfersystemforlettucewasestablishedExplantswerefirstpre—culturedonMSmediumfor1—2days，thenco—culturedonoriginalMSmediumwithanAgrobacteriumtumefaciensstrain(LBA4404)carryingthemodifiedpBll21plasmidwhichcont
4、ainslysine～richproteingenedrivenbyCaMV35SpromoterExplantweretransferredtoMSmediumwithKan100m【g／LandCarb500mg／L，andbudselongatedonMSmediumcontainingthesameconcentrationKanAllelongatedshootrootedon112MSmediumthentransferre
5、dshootgrew2cmStudiesontheeffectsofvariousfactorsinfluencingtransformationindicatedthataseriousoffactors，includingtheageofexplant，theconditionofAgrobacteriumtumefaciens，thepre—cultureofexplants，thetimeoftransformationande
6、o—culture，influencestherateoftransformationoflettuceTheresultsindicatedthat：theoptimalexplantsagefortransformationwas23days；theAgrobacteriumtumefaciensinthelogarithmtimehavethemostabilityfortransformation；theoptimaltimeo
7、ftransformationwas20minwhentheAgrobacteriumtumefacienswasdilutedtoOD600208：theoptimaldurationofpre—culturewas1～2daysthatwouldimprovetherateoftransformation；Thedurationof23daysco—culturemightimprovetherateoftransformation
8、tooThetransgenicnatureofregenetantswasindicatedbyplantgrowthonmediumcontainingKanPCRandsouthernblotanalysisdemonstratedfurtherlysine—richproteingeneintegratedintotransgenicplantsSimultaneouslytheresultofRTPCRdetectioncon
9、firmedthetargetgenehasbeenexpressedontheleveloftranscriptionDataanalysisdemonstratedthelysinecontentoftheTOgenerationtransgeniclettucehasbeendifferentlyimprovedandinoneofthemostincreasedby95％GeneticanalysisforsomeoftheT1
10、generationtransgenicplantsbyPCRdisplayedthatthetargetgenecaninheritintoT1generationtransgenicplantsButtherateofgeneticoflysinerichproteingeneinthelettucewaslowKeywards：lysinerichproteingene；transgeniclettuce；lysineconten
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