大熊貓腸道微生物群落指紋圖譜分析和益生元成分對仔豬豬腸擬桿菌調(diào)節(jié)作用的定量研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文采用了人菌群相關(guān)（HFA）仔豬模型，對飼喂了益生元(果寡糖)的仔豬采集其糞便樣品，以糞便樣品中的優(yōu)勢菌擬桿菌為研究對象，采用以雙鏈特異性熒光染料SYBR-Green I的實時熒光定量PCR技術(shù)研究寡糖對仔豬腸道內(nèi)擬桿菌的影響。首先，設(shè)計一含有擬桿菌基因組特異性片段的DNA序列的載體，根據(jù)其濃度計算其拷貝數(shù)，將其進(jìn)行梯度稀釋，作為標(biāo)準(zhǔn)樣品，然后從樣品中抽提糞便微生物總DNA，以此總DNA和標(biāo)準(zhǔn)樣品為模板，以Bacteriods屬特異性

2、引物進(jìn)行實時熒光定量PCR反應(yīng)，再應(yīng)用軟件進(jìn)行對Bacteriods基因組的拷貝數(shù)進(jìn)行計算，從而得到了相關(guān)Bacteriods菌群數(shù)量的變化，并由此評價益生元(果寡糖)對此菌群水平的影響。實驗結(jié)果表明，Bacteriods在對照組和試驗組飼喂前后其種群水平的平均值為106copies左右/ng總DNA，Bacteriods在量上雖呈現(xiàn)出一定的波動，但波動的范圍也僅限于一個數(shù)量級內(nèi)的變化(Δ copies of Bacteriods D

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