三種楊樹NHX1和SOS1基因及其啟動子功能研究.pdf

1、以胡楊(Populus euphratica)、俄羅斯楊（P. russkii）和新疆楊（P. bollena）為實驗材料，研究了鹽脅迫下相關基因的表達；克隆了胡楊的NHX1和SOS1基因，構建酵母表達載體，對其功能進行了初步分析；并克隆了胡楊的NHX1和SOS1基因的啟動子及俄羅斯楊和新疆楊SOS1基因的啟動子，并將其轉入俄羅斯楊中，以期進一步揭示NHX1和SOS1基因在楊樹Na+轉運調控中的作用，對研究楊樹Na+的分配和抗鹽性都具有

2、重要意義。為今后作物耐鹽育種提供方法指導與理論支持。主要結論如下：
　?。?）通過熒光定量PCR分析了鹽脅迫下相關基因的表達量的差異。其中胡楊的NHX1表達量下降，而SOS1基因的表達量上升至原來的將近3倍。整體來說，當發(fā)生鹽脅迫時，俄羅斯楊鹽脅迫相關基因的表達量變化幅度并不明顯。HKT1-1和HKT1-2的表達量表現出先上升后下降的趨勢，HKT1-1和HKT1-2短時間內表達量的提高可以為植物能夠適應長期脅迫提供信號，促使植物來

3、合成其它的滲透調節(jié)物質。
　?。?）克隆了胡楊NHX1和SOS1基因，對其跨膜結構域進行分析后發(fā)現NHX1蛋白有10個跨膜結構域，SOS1蛋白有12個跨膜結構域。將兩個基因雙酶切后連接酵母表達載體pYES2，并轉化鹽敏感型酵母G19，異源表達胡楊NHX1和SOS1基因，以期對NHX1和SOS1基因功能進行驗證。但PeNHX1和PeSOS1不能完全代替酵母ScNHX1蛋白的功能。
　?。?）克隆了胡楊的 NHX1和 SOS1基

4、因的啟動子及俄羅斯楊和新疆楊 SOS1基因的啟動子。對其進行生物學信息分析，表明它們在序列上的差異比較明顯。并且啟動子中順式作用元件的數量和位置也有一定的差異。但均具有與鹽脅迫誘導有關作用元件GT1-motif。
　?。?）構建了啟動子::GUS基因表達載體 PeNHX1Pro:: GUS、PeSOS1Pro:: GUS、PrSOS1Pro::GUS和PbSOS1Pro::GUS并將其轉入俄羅斯楊。以俄羅斯楊葉片為外植體誘導愈傷組