動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物殘留檢測(cè).pdf

1、抗菌藥是指能夠抑制或殺滅細(xì)菌，用于預(yù)防和治療細(xì)菌性感染的藥物。常用的抗菌藥主要有β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、喹諾酮類和磺胺類等。磺胺類藥物(sulfonamides，SAs)是具有對(duì)氨基苯磺酰胺結(jié)構(gòu)的一類藥物的總稱，對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌有良好的抗菌活性。SAs與對(duì)氨基苯甲酸(PABA)結(jié)構(gòu)相似，可與之競(jìng)爭(zhēng)性的與二氫蝶酸合酶結(jié)合，阻止細(xì)菌二氫葉酸的合成，從而發(fā)揮抑菌作用。目前SAs廣泛應(yīng)用于人類和動(dòng)物細(xì)菌感染性疾病

2、的治療和預(yù)防，但是磺胺類藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間和代謝時(shí)間較長(zhǎng)，容易在體內(nèi)蓄積，造成危害，如出現(xiàn)晶尿、血尿、新生兒黃疸等嚴(yán)重危害。因此，各國(guó)對(duì)食品中SAs最大殘留制定了限量規(guī)定?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)對(duì)動(dòng)物源性食品中SAs殘留檢測(cè)多采用高效液相色譜法和高效液相色譜-質(zhì)譜法。傳統(tǒng)的液液萃取和固相萃取對(duì)樣品進(jìn)行前處理有機(jī)溶劑用量大，污染環(huán)境。本文建立了靈敏、簡(jiǎn)單、迅速、安全的樣品處理方法，分別用HPLC和HPLC-MS/MS法對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，全文有兩部分構(gòu)成

3、。
　　第一部分 HPLC測(cè)定動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物殘留
　　目的:建立免疫親和柱凈化-高效液相色法檢測(cè)動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物的殘留分析方法。通過(guò)與液液萃取和固相萃取比較，免疫親和柱凈化效果更好，適用于動(dòng)物源性食品種痕量磺胺類藥物的檢測(cè)。
　　方法:用80％乙醇溶液提取樣品，稀釋后直接過(guò)磺胺類藥物免疫親和柱凈化，氮?dú)獯蹈珊笥昧鲃?dòng)相定容，再用高效液相色譜法檢測(cè)。色譜柱:Aglient C18柱(3.5μm

4、，4.6×150 mm);流動(dòng)相:甲醇(A)-1.1％乙酸10 mmol/L PBS溶液(B)，梯度洗脫:0-15 min，A:15％，15-40 min，A:15％-40％;紫外檢測(cè)波長(zhǎng):270 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃:進(jìn)樣量:50μL。
　　結(jié)果:16種磺胺類藥物的分離度均大于1.5，在0.01～0.2 mg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r＞0.999，n=5);檢測(cè)限為2～5 ng/mL;三種不同濃度的

5、加樣回收率在59.6％～111.7％之間，RSD值在0.57％～7.21％之間。
　　結(jié)論:免疫親和柱的凈化效果比液液萃取和一般固相萃取效果好。凈化后的樣品通過(guò)高效液相色譜法進(jìn)行分離分析，能夠很好的實(shí)現(xiàn)動(dòng)物源性食品中磺胺殘留檢測(cè)。
　　第二部分 HPLC-MS/MS測(cè)定動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物殘留
　　目的:建立動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物的免疫親和柱進(jìn)化-HPLC-MS/MS測(cè)定的方法。
　　方法:色譜

6、柱:Shimadzu VP-ODS C18（2.0×150 mm，5μm）;流動(dòng)相:以乙腈和2 mmol/L乙酸銨水溶液（含0.2％甲酸），梯度洗脫;流速:0.3 mL/min;柱溫:40℃;進(jìn)樣體積:10μL;質(zhì)譜條件:電噴霧電壓(IS):5500 V;霧化氣壓力(GS1):50 Psi;氣簾氣壓力(CUR):35 Psi;輔助氣壓力(GS2):60 Psi;離子源溫度(TEM):550℃;碰撞室入口電壓(EP)為10V，碰撞室出口電