PRRSV感染對(duì)PAMs免疫相關(guān)因子的影響.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndromevirus，PRRSV)引起的病毒性傳染病，PRRSV與豬肺泡巨噬細(xì)胞(porcine alveolarmacrophages，PAMs)之間的相互作用與疾病的發(fā)生密切相關(guān)。為了解PRRSV對(duì)仔豬固有

2、免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的動(dòng)態(tài)影響，檢測(cè)了PRRSV感染后PAMs免疫相關(guān)因子基因轉(zhuǎn)錄及其表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。
　　 選取5頭PCV2和PRRSV血清抗體和抗原均為陰性的35日齡斷奶仔豬，前腔動(dòng)脈放血致死，無(wú)菌取出肺臟，灌洗出PAMs進(jìn)行體外培養(yǎng)，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組接種PRRSV(GXBB株)，對(duì)照組加等量1640細(xì)胞培養(yǎng)液，并分別于0h、12h、24h收取細(xì)胞，提取細(xì)胞總RNA并反轉(zhuǎn)為cDNA，用定量RT-PCR方法檢測(cè)了

3、PRRSV感染PAMs后免疫相關(guān)因子基因表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果顯示，IL-2先上升后降低，24h時(shí)顯著低于對(duì)照組;IL-6mRNA水平接種PRRSV后逐漸升高，24h明顯高于同時(shí)間對(duì)照組;PRRSV可使PAMs表達(dá)IL-8逐漸降低，12h和24h均顯著低于對(duì)照組;PRRSV可逐漸上調(diào)體外培養(yǎng)PAMs IL-10的表達(dá)，24h時(shí)顯著高于同時(shí)間對(duì)照組;PAMs中TNF-α mRNA的表達(dá)在PRRSV的作用下逐漸上調(diào)，12h和24h均顯著高于對(duì)

4、照組，說(shuō)明PRRSV在引起一過(guò)性免疫增強(qiáng)后，可造成明顯的免疫抑制。
　　 為進(jìn)一步了解PRRSV對(duì)PAMs分泌細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)影響，選取5頭PCV2和PRRSV血清抗體均為陰性的35日齡的斷奶仔豬，前腔動(dòng)脈放血致死后，取出肺臟，無(wú)菌罐洗出肺泡巨噬細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組接種PRRSV(GXBB株)，對(duì)照組加等量1640細(xì)胞培養(yǎng)液，并分別于0h、12h、24h收取細(xì)胞培養(yǎng)上清液，用ELISA法檢測(cè)IL-6、IL-

5、10、TNF-a含量的動(dòng)態(tài)變化，分析PRRSV對(duì)PAMs免疫功能的影響。結(jié)果顯示，PRRSV作用后12h和24h，PAMs培養(yǎng)上清液中IL-6和TNF-α含量均顯著高于對(duì)照組(p＜0.05); PRRSV作用12h時(shí)攻毒組IL-10的含量較對(duì)照組高，而24h攻毒組IL-10的含量較對(duì)照組低，TNF-a在12h時(shí)顯著高于對(duì)照組(p＜0.05)，24h雖仍高于對(duì)照組，但差異不顯著(p＞0.05)。由此可見(jiàn)，PRRSV在感染24h內(nèi)，在激活體