ABA誘導水稻中SAPKs活化及其對Osrbohs的調節(jié).pdf

1、植物激素脫落酸(ABA)調節(jié)植物多種生長發(fā)育過程，包括種子貯藏蛋白的合成、種子耐脫水性與休眠、種子的萌發(fā)、幼苗的生長以及調節(jié)植物對各種脅迫的反應。當植物受到各種環(huán)境脅迫如干旱、高鹽和寒冷等時，其體內會合成和積累ABA。SnRK蛋白激酶是廣泛存在于植物中的一類Ser/Thr類蛋白激酶，參與植物體內多種信號途徑的轉導，在植物的抗逆境生理過程中扮演了重要角色。因此闡明ABA信號轉導中SnRK的功能具有重要意義。
　　本研究以徐稻4號粳稻

2、品種作為研究對象，研究了水稻基因組中與擬南芥SnRK2.6基因同源的SAPK8～10基因在ABA和H2O2處理下基因表達與激酶活性的變化進程、SAPK8～10激酶的亞細胞定位及其對Osrbohs的關系。主要研究結果如下:
　　外源ABA(100μM)處理水稻葉片1h能顯著提高SAPK8～10的激酶活性，但并不影響其基因表達量;外源H2O2(10mM)處理30min能也顯著提高SAPK8～10的激酶活性，且早于ABA的激活時間。

3、r>　　利用原生質體瞬時表達與瞬時沉默體系和熒光定量PCR技術研究SAPK8～10基因的過表達與基因沉默對水稻NADPH氧化酶基因Osrbohs的影響。結果顯示，SAPK8～10基因的過表達與沉默對Osrbohs的轉錄水平沒有明顯誘導。
　　利用基因重組技術將SAPK8～10基因的編碼序列構建到pXZP008真核瞬時表達載體中，采用PEG融合法轉化水稻原生質體細胞，以黃色熒光蛋白基因為報告基因，通過激光共聚焦顯微鏡觀察亞細胞定位。